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無乳鏈球菌(StA)核酸檢測試劑盒使用方法

閱讀:389          發(fā)布時間:2025-3-26

無乳鏈球菌(StA)核酸檢測試劑盒使用方法:

1. 樣品處理(樣本處理區(qū))

1.1 樣本前處理

按照試劑盒操作說明或者微生物樣品處理方法做好樣品前處理,。

1.2 DNA 提取

根據(jù)您實驗室的具體情況和樣品類型,選擇適當?shù)奶崛〔呗苑椒?。為了使實驗結(jié)果穩(wěn)定,、有效,、可靠,我們建議使用商品化的試劑盒進行提取,,嚴格按照對應試劑盒說明書進行操作,,樣本核酸提取過程中應避免污染,提取好的模板樣品如不能立即檢測,,建議-15℃以下保存,。

推薦采用我們公司研發(fā)生產(chǎn)的試劑盒:Hypure 病毒基因組 DNA 提取試劑盒

2. 試劑配制(試劑準備區(qū))

2.1 從-15℃以下冰箱中取出試劑盒平衡到室溫(20~25℃),注意避免強光照射,,待溶解后振蕩混勻并低速離心 10 s,,使用低吸附吸頭分液取樣,避免試劑損失和浪費,。

2.2 根據(jù)待檢測樣本總數(shù),,設所需要的 PCR 反應管管數(shù)為 N(N=樣本數(shù)+1 管陰性對照+1 管陽性對照;樣品每滿 7 份,,多配制 1 份),,每測試反應體系配制如下表:

試劑

煙曲霉反應液

煙曲霉擴增液

用量(樣本數(shù)為N)

19.5μL

0.5μL

2.3 在適當容積的無菌離心管中加入上述試劑,充分振蕩混勻后 2000 rpm 離心 10 s,,按照 20 μL/管分裝量將試劑分裝至八聯(lián) PCR 反應管中,。

2.4 蓋緊八聯(lián) PCR 反應管蓋, 并注意做好相應標識(請標記在八聯(lián) PCR 反應管蓋兩端突出部位,切勿標記在八聯(lián) PCR 反應管蓋中間,,以免影響信號采集),。將 PCR 反應管轉(zhuǎn)移至樣本準備區(qū),剩余試劑放回-15℃以下冰箱冷凍保存,。

3. 加樣(樣本處理區(qū))

將步驟 1.2 提取的 DNA,、陽性質(zhì)控品、陰性質(zhì)控品各取 5μL,,分別加入相應的反應管中,,蓋好管蓋,混勻,,短暫離心,,核酸加樣過程中應避免污染。


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