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人α甘露糖苷酶酶聯(lián)免疫分析試劑盒雙抗體夾心法(檢測未知抗原)

閱讀:953          發(fā)布時間:2024-2-5

人α甘露糖苷酶(α Manase)酶聯(lián)免疫分析試劑盒雙抗體夾心法(檢測未知抗原)

1,、用緩沖液將抗體稀釋至1-10ug/ml,。在反應孔中加0.1ml,,4℃ 過夜,。次日,棄去孔內溶液,,用洗滌緩沖液洗3次,。

2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應孔中,,置37℃ 孵育1小時,。然后洗滌(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔),。

3,、加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~1小時,,洗滌,。

4、加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,,37℃ 10~30分鐘,。

5、終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml

6,、結果判定:可于白色背景上,,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,,陰性反應為無色或極淺,,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+",、“-"號表示,。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,,則410nm)處,,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,,即為陽性,。


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