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小鼠雜交瘤細(xì)胞,；IIB11培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）培養(yǎng)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091),，90%,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%,。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%；二氧化碳,，5%,。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。

3）凍存液：90%血清,，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配,，液氮儲存,。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

對于懸浮細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM,，常溫條件下離心5分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

中間絲家族孤啡肽2蛋白抗體

CD339抗體

連接粘附分子1抗體

活化蛋白激酶D抗體

Jun激活區(qū)域-連接蛋白1抗體

磷酸化蛋白酪氨酸激酶JAK-2抗體

蛋白酪氨酸激酶JAK-3抗體

磷酸化蛋白酪氨酸激酶JAK-3抗體

磷酸化蛋白酪氨酸激酶JAK-3抗體

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蛋白質(zhì)酪氨酸激酶JAK2抗體

JWA蛋白抗體

連接蛋白JPH3抗體

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蛋白質(zhì)酪氨酸激酶JAK-1抗體

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組蛋白去甲基化酶JMJD5抗體

磷酸化γ連環(huán)蛋白抗體

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氨基末端激酶1/2抗體