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人成熟促進因子(MPF)免疫組化試劑盒?實驗步驟
閱讀：1287 發(fā)布時間：2021-12-9人成熟促進因子(MPF)免疫組化試劑盒實驗步驟：
1.烤片： 將待做切片置于切片架上,，于60℃恒溫烤箱中至少烤1 hr；
2.脫蠟： 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟3 次（即二甲苯Ⅰ,、Ⅱ,、Ⅲ），每次10 min,；
3.水化： 切片經(jīng)下行酒精水化,，無水乙醇5min，95%乙醇2 次（每次2min）,，85%乙醇2 min,；75%乙醇2min，自來水沖洗,，ddH2O 洗2×2min,；
4.抗原修復(fù)： 根據(jù)抗體說明書推薦方法進行抗原修復(fù)，常采用高壓,、微波（溫
度達到98~100℃）或酶消化修復(fù)法,，室溫自然冷卻，自來水沖洗,，ddH2O 洗2×2min,，TBS 洗滌（2×2min）（具體修復(fù)方法見附1）* 注：有些抗原勿需修復(fù)，直接進入第5 步封閉,。
5.封閉： 滴加試劑B,，37℃濕盒孵育30 min；
6.加一抗：滴加用試劑C（即用型一抗）,，37℃濕盒孵育2 hr 或4℃過夜,；
7.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min）；
8.封閉： 滴加試劑B,，37℃濕盒孵育10 min,；
9.加二抗： 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗（試劑D）,，37℃濕盒中孵育30 min；
10.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min）,；
11.封閉： 滴加試劑Tween 20，37℃濕盒孵育封閉20 min,；
12.加HRP-SA： 滴加用抗體稀釋液稀釋的試劑E（1：50~200,，終濃度5~20 nM），
37℃濕盒中孵育30 min,；
13.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min）,，TBS 洗滌（2×5 min）；
14.顯色：應(yīng)用DAB 溶液（試劑F）顯色,；
15.復(fù)染：自來水充分沖洗,，復(fù)染，脫水,，透明,；
16.封片： 待組織標本干后，用試劑緩沖甘油封固劑封片,；
17.觀察成像： 顯微鏡下觀察成像,。
磷酸化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體
磷酸化活化復(fù)制因子2抗體
磷酸化活化復(fù)制因子2抗體
磷酸化細胞周期末期促進復(fù)合蛋白APC1抗體
發(fā)育分化增強因子1抗體
磷酸化發(fā)育分化增強因子1抗體
蛋白激酶B3
肌動蛋白結(jié)合蛋白Girdin抗體
蛋白激酶A2抗體
血管緊張素Ⅱ受體2抗體
ASH1蛋白抗體
芳香乙酰胺脫乙酰基酶樣蛋白2抗體
血管內(nèi)皮細胞遷移蛋白抗體
醛糖還原酶相關(guān)蛋白質(zhì)抗體
膽汁酸結(jié)合蛋白DDH2抗體
血管生成素樣蛋白3抗體
甘油酯激酶線粒體抗體
磷酸化內(nèi)收蛋白a1抗體
自噬體ATG16L2蛋白抗體
酸性磷酸酶抗體
酸性磷酸酶抗體
極光激酶A相互作用蛋白1抗體
載脂蛋白樣蛋白6抗體