化工儀器網(wǎng)
技術(shù)文章
線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅰ活性測試盒操作步驟
閱讀：1042 發(fā)布時間：2021-11-23線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅰ活性測試盒操作步驟:
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔，在di一,、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,，然后在di一,、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻,；然后從di一孔,、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三,、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,，再各取50μl分別加到第五,、第六孔中，再在第五,、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,，混勻；混勻后從第五,、第六孔中各取50μl分別加到第七,、第八孔中，再在第七,、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九,、第十孔中,，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉,。（稀釋后各孔加樣量都為50μl,，濃度分別為180 ng/L，120 ng/L ,，60 ng/L,，30 ng/，15 ng/L）,。
2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,，其余各步操作相同）、待測樣品孔,。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,，然后再加待測樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,，盡量不觸及孔壁,，輕輕晃動混勻。
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用,。
5. 洗滌：小心揭掉封板膜,，棄去液體，甩干,，每孔加滿洗滌液,，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次,，拍干,。
6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外,。
7. 溫育：操作同3,。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl,，再加入顯色劑B50μl,，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl,，終止反應(yīng)（此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）,。
11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）,。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘,。
渾濁紅球菌
香茅醇假單胞菌
解肝磷脂土地桿菌
紅平紅球菌
土生拉烏爾菌（土生克雷伯菌）
解藻弧菌（溶藻弧菌）
洋蔥伯克霍爾德氏菌
霍亂弧菌
日勾維腸桿菌
施氏假單胞菌
表皮葡萄球菌
拜氏梭菌
馬鏈球菌獸疫亞種
壞死梭桿菌壞死亞種
泛養(yǎng)副球菌
解淀粉芽孢桿菌
乳酸片球菌
戊糖片球菌
朝鮮芽孢八疊球菌
宋氏志賀氏菌
基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1(SDF1)ELISA試劑盒
活化T-細(xì)胞核因子2(NFATC2)ELISA試劑盒
紅細(xì)胞衍生核因子2樣蛋白2(NFE2L2)ELISA試劑盒
紅細(xì)胞膜蛋白7.2b(STOM)ELISA試劑盒
紅細(xì)胞補(bǔ)體受體1(CR1)ELISA試劑盒
黑素瘤細(xì)胞黏附分子(MCAM)ELISA試劑盒
含V-Set域T細(xì)胞激活抑制因子1(VTCN1)ELISA試劑盒
含Toll白細(xì)胞介素1受體域銜接蛋白(TIRAP)ELISA試劑盒
歸巢關(guān)聯(lián)細(xì)胞黏附分子(HCAM)ELISA試劑盒
骨髓基質(zhì)細(xì)胞抗原2(BST2)ELISA試劑盒