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鵝丙二醛ELISA檢測(cè)試劑盒操作步驟
閱讀:1101 發(fā)布時(shí)間:2021-10-19鵝丙二醛ELISA檢測(cè)試劑盒操作步驟:
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,,在di一,、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在di一,、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,,混勻;然后從di一孔,、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三,、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五,、第六孔中,,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,,混勻,;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七,、第八孔中,,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,,混勻后從第七,、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,,濃度分別為180 ng/L,,120 ng/L ,60 ng/L,,30 ng/,,15 ng/L)。
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,,其余各步操作相同),、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍),。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,,輕輕晃動(dòng)混勻,。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用,。
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,,棄去液體,甩干,,每孔加滿洗滌液,,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,,拍干,。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3,。
8. 洗滌:操作同5,。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,,輕輕震蕩混勻,,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色),。
11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘,。
自噬相關(guān)蛋白10抗體
?;o酶A結(jié)合結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體
氨基酰化酶1抗體
脂肪甘油三酯脂酶抗體
磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1抗體
雙調(diào)蛋白(結(jié)腸直腸細(xì)胞源性生長(zhǎng)因子)抗體
磷酸化水通道蛋白2抗體
粘附相關(guān)激酶抗體
磷酸化粘附相關(guān)激酶抗體
磷酸化蛋白激酶B抗體
磷酸化水通道蛋白2抗體
磷酸化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體
磷酸化蛋白激酶B抗體
磷酸化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體
磷酸化活化轉(zhuǎn)錄因子4抗體
磷酸化雄激素受體抗體
磷酸化雄激素受體抗體
磷酸化蛋白激酶AKT1,2,3抗體
磷酸化蛋白激酶B抗體
磷酸化活化復(fù)制因子2抗體
凋亡相關(guān)蛋白3抗體
自噬相關(guān)蛋白18抗體
自噬相關(guān)蛋白4A抗體
載脂蛋白A4抗體
12脂氧合酶抗體
血管緊張素III抗體
腺苷酸環(huán)化酶3抗體