大容量低速冷凍離心機(jī)結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單,、安裝方便,、操作容易,能保持產(chǎn)品的晶粒形狀,,采用彈性支撐結(jié)構(gòu),,能減少由于不均勻負(fù)載引起的振動(dòng),其運(yùn)轉(zhuǎn)平穩(wěn),。能實(shí)現(xiàn)密封,,避免對(duì)物料的污染。
下面咱們來(lái)了解下采用大容量低速冷凍離心機(jī)提染色體DNA,,可直接應(yīng)用于常規(guī)的分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn),,包括PCR、限制性?xún)?nèi)切酶的切割,,以及基因組文庫(kù)的構(gòu)建的實(shí)際應(yīng)用:
1,、取1ml過(guò)夜培養(yǎng)菌液于8000g,離心機(jī)離心2min,。去除培養(yǎng)基后,,用400ulSTE緩沖液(100mMNaCl,10mMTris/HCl,,1mMEDTA,,pH8.0)重懸菌體,按相同條件離心清洗菌體兩次,。
2,、收集的菌體用200ulTE緩沖液(10mMTris/HCl,1mMEDTA,,pH8.0)懸起后加約50mg直徑425-600um規(guī)格的玻璃珠,,再加入100ulTirs飽和苯酚。
3,、上述混合液在漩渦振蕩器上振蕩(細(xì)菌,,振蕩60s;酵母,,振蕩120s-200s),,隨后于4℃,13000g,,離心5min,。
4、吸取上層水相(約160ul)轉(zhuǎn)移至一個(gè)新的離心管中,,加TE緩沖液補(bǔ)至200ul,,再加入100ul氯仿混勻后,,于4℃,13000g,,離心5min,。重復(fù)此步兩到三次。
5,、轉(zhuǎn)移上層水相(約160ul)至一個(gè)新的離心管中,,補(bǔ)加40ulTE和5ulRNase(10mg/ml),37℃消化10min,。
6,、加入100ul氯仿混勻于4℃,13000g,,離心5min,。
7、轉(zhuǎn)移上層水相(約150ul)至一個(gè)新的離心管中,。
8,、至此,上層水相即含有純化好的基因組DNA,,可直接用于隨后的常規(guī)分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn),。
希望上述內(nèi)容能夠幫助大家更好的了解本產(chǎn)品。
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