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1、取材,、 固定,、包埋、切片;
2,、取已粘好烘 干的切片兩塊,,放入二甲苯(一)→二甲苯(二)(各3-4分鐘)的染缸中進(jìn)行脫蠟,再經(jīng)100%乙醇(一)
→100%乙醇(二)→95%乙醇→90%乙醇 →70%乙醇→30%乙醇→水,。每級(jí)各一分鐘,,在移切片時(shí),用鑷子夾住切片震蕩
并提起,,放下反復(fù)幾次,,在移入下一染缸邊緣前稍停留,讓溶液滴凈后,,再入下 一染缸,,以免把上一染缸溶液過多帶入下
一染缸,而影響切片質(zhì)量;
3,、將其中一塊切片以蠟筆作一標(biāo)記(用作對(duì)照組切片),,放入沸水中煮沸5分鐘;
4,、將兩塊切片均放入AKP作用液中孵育30-60分鐘,作用液要事先預(yù)熱到37℃,,水浴中進(jìn)行;
5,、取出切片在蒸餾水中洗滌;
6、放入硝.酸.鈷溶液2-3分鐘;
7,、蒸餾水沖洗干凈,,否則切片易被污染,影響定位;
8,、切片浸入硫化銨中2-3分鐘;
9,、蒸餾水沖洗干凈;
10、經(jīng)各級(jí)酒精脫水,,即30%乙醇→70%乙醇→90%乙醇→950%乙醇→100%乙醇(二)→100%乙醇(一),,各級(jí)一分鐘。
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