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IHC免疫組化染色冰凍切片
  • IHC免疫組化染色冰凍切片

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更新時間:2025-01-22 21:00:25

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冰凍切片4~8mm,,室溫放置30分鐘后,入4℃丙酮固定10分鐘,,PBS洗,,5分鐘×3。用3%過氧化氫孵育5~10分鐘,,消除內(nèi)源性過氧化物酶的活性。PBS洗,,5分鐘×2,。

免疫組化染色步驟:
1 冰凍切片4~8um,室溫放置30分鐘后,,入4℃丙酮固定10分鐘,,PBS洗,5分鐘×3,。用3%過氧化氫孵育5~10分鐘,,消除內(nèi)源性過氧化物酶的活性。PBS洗,,5分鐘×2,。
2 5~10%正常山羊血清封閉,室溫孵育10分鐘,。傾去血清,,勿洗,滴加適當比例稀釋的一抗或一抗工作液,37℃孵育1~2小時或4℃過夜,。
3 PBS沖洗,,5分鐘×3次。
4 滴加適當比例稀釋的標記二抗,,37℃孵育10~30分鐘,;或滴加第二代標記二抗工作液,37℃或室溫孵育10~30分鐘,。
PBS沖洗,,5分鐘×3次。
5 滴加適當比例稀釋的辣根酶標記鏈霉卵白素,,37℃孵育10~30分鐘,;或第二代辣根酶標記鏈霉卵白素工作液,37℃或室溫孵育10~30分鐘,。
6 PBS沖洗,,5分鐘×3次。
7 顯色劑顯色
8 自來水充分沖洗,,復染,,封片。

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