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細(xì)胞爬片制備

(1)如果使用載坡片或蓋坡片,，必須在使用之前滅菌,。可以一次滅菌并貯存在無菌狀態(tài)下,。如果使用少量的蓋坡片,，用金

屬鑷子夾住蓋玻片，在70%乙醇中浸泡,，然后在火焰上烤干,。要輕輕地錫取，以防破裂為了方便起見,，可以將蓋玻片浸泡于

70%的一醇中,，使用時(shí)放在火焰上處理。如果使用的蓋坡片或載玻片數(shù)量較多,，可以將它們放于的金屬支架上,，然后高溫消

毒,。如果需要的數(shù)量更大，則可將其放在耐熱的容器中,，干烤2小時(shí),。

(2)在無菌狀態(tài)下,把干燥的坡片放于適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)加中。蓋坡片可以用金屬鑷子錫取,圓形蓋玻片可以放在24孔培養(yǎng)板的

孔中,，直徑90mm的培養(yǎng)皿能夠放入10-15張蓋玻片,，或者放入一張標(biāo)準(zhǔn)的載玻片。

(3)將懸浮的細(xì)胞放入組織培養(yǎng)灬中,，培養(yǎng)至少24小時(shí),，讓細(xì)胞貼附在坡片上。要想得到一個(gè)較好的結(jié)果,，在加細(xì)胞時(shí),，

密度應(yīng)低，以防細(xì)胞密度過高,。

(4)如果細(xì)胞數(shù)目有限,，可把細(xì)胞懸液直接滴在坡片上，靜置4小時(shí)后再輕輕加入培養(yǎng)液,。通過這種方式,，大部分細(xì)胞將粘

附于玻片上，然后再培養(yǎng)約24小時(shí),，使細(xì)胞適當(dāng)擴(kuò)增,。此時(shí),，取出載玻片或蓋玻片可進(jìn)行固定,。