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一,、服務(wù)介紹

穩(wěn)定細胞株篩選常用物理方法（電轉(zhuǎn)）、化學(xué)方法（脂質(zhì)體等）,、生物方法（病毒）,。

二、實驗原理

外源基因在細胞中的表達可分為兩大類,，一類是瞬時表達,，一類是穩(wěn)定表達（又叫表達）。前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色體中,，雖然可以達到高水平的表達,，但通常只持續(xù)幾天。后者外源DNA整合到宿主細胞染色體上,，使宿主細胞可*表達目的基因,。建立穩(wěn)定細胞株，一般是根據(jù)不同基因載體中所含有的抗性標(biāo)志選用相應(yīng)的藥物對靶細胞進行篩選,。常用的抗性標(biāo)記基因有潮霉素（hygromycin）,、新霉素（neomycin）和嘌呤霉素（puromycin）。

三,、實驗流程

1,、載體構(gòu)建（表達質(zhì)粒載體、病毒載體）,；

2,、轉(zhuǎn)染/感染；

3、目的蛋白初步檢測,；

4,、抗生素篩選；

5,、目的蛋白再次檢測（定性/半定量）,；

6、單克隆細胞株穩(wěn)定性檢測,。