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測定意義:
尿素是生物體內(nèi)含氮化合物分解的終產(chǎn)物,，在尿酶催化下分解轉(zhuǎn)化成氨,。血液尿素氮是腎功能的主要指標之一。
測定原理:
在堿性條件下,，尿酶水解尿素產(chǎn)生氨,，氨與次氯酸反應(yīng)生成氯胺，再與酚衍生物作用生成綠色吲哚酚,，在630nm處有特征吸收峰,。
自備實驗用品及儀器
天平、研缽,、常溫離心機,、可見分光光度計、1 mL玻璃比色皿,、恒溫水浴鍋,。試劑組成和配制: .
標準品:液體1mLX1支，4'C保存,。
試劑一:粉劑X1瓶,，4'C避光保存，臨用前加10mL 蒸餾水充分溶解,。
試劑二:液體20mLX1瓶,，4C避光保存。
試劑三:液體20mLX1瓶,，4C避光保存,。
樣品處理:
1.組織:按照質(zhì)量(g): 蒸餾水體積(mL)為1: 5~10的比例(建議稱取約0.1g，加入1mL蒸
餾水)加入蒸餾水,，勻漿后于25C，10000g 離心10min,，取上清待測,。
2.細胞:按照細胞數(shù)量(10個):蒸餾水體積(mL)為500^ 1000: 1的比例(建議500萬細
胞加入1mL蒸餾水),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒，間隔7秒,，總時間3min);
然后4C,，10000g 離心10min，取上清置于冰上待測,。
3.血清或其它液體:直接檢測,。