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服務(wù)介紹

1)技術(shù)原理:

石蠟切片（paraffin section）是組織學(xué)常規(guī)制片技術(shù)中為廣泛應(yīng)用的方法。石蠟切片不僅用于觀察正常細(xì)胞組織的形態(tài)結(jié)構(gòu),，也是病理學(xué)和法醫(yī)學(xué)等學(xué)科用以研究,、觀察及判斷細(xì)胞組織的形態(tài)變化的主要方法，而且也已相當(dāng)廣泛地用于其他許多學(xué)科領(lǐng)域的研究中,?；畹募?xì)胞或組織多為無色透明，各種組織間和細(xì)胞內(nèi)各種結(jié)構(gòu)之間均缺乏反差,，在一般光鏡下不易清楚區(qū)別出,；組織離開機(jī)體后很快就會(huì)死亡，失去原有正常結(jié)構(gòu),，因此,，組織要經(jīng)固定、石蠟包埋,、切片及染色等步驟以免細(xì)胞組織死亡,，而能清晰辨認(rèn)其形態(tài)結(jié)構(gòu),。

2）特點(diǎn)：

石蠟切片標(biāo)本可以*保存使用，為*性顯微玻片標(biāo)本,。

冰凍切片制作過程較石蠟切片快捷,、簡便，而多應(yīng)用于手術(shù)中的快速病理診斷．組織變化不大,能很好保存脂肪,，類脂等成分,。能夠比較完好地保存各種抗原活性及酶類，特別是對(duì)于那些對(duì)有機(jī)溶劑或熱的溫度耐受能力較差的細(xì)胞膜表面抗原和水解酶保存較好,。

石蠟切片

（一）石蠟切片前的準(zhǔn)備

1．切片刀,。傳統(tǒng)的切片刀在使用之前，要在顯微鏡下檢查刀口的損傷程度,，然后進(jìn)行磨刀?，F(xiàn)在也可以使用一次性刀片，可省去磨刀,。

2．修整蠟塊：切去組織周圍過多的石蠟,，一般情況下在組織周圍留有約1~2mm的石蠟邊，兩邊平行,。

3．蠟塊固定：修整好的蠟塊先固定在事先準(zhǔn)備好的小方木塊或者金屬塊上,，固定方法是把蠟鏟先在酒精燈上加熱，再將蠟塊底部烙熔,，迅速烙粘在小方木塊或金屬塊底座上,。

4．載玻片擦洗干凈后，在其表面涂上粘附劑（蛋白甘油,、APES或多聚賴氨酸）,，根據(jù)染色方法選擇不同的粘附劑。

5．準(zhǔn)備好毛筆,、鑷子、染色架,。

6．調(diào)好展片器內(nèi)水的溫度（45℃）,，有時(shí)也可以加些酒精到水中。

（二）石蠟切片

1．將切片刀裝在刀片機(jī)的刀架上并固定緊,，固定蠟塊底座或蠟塊,，調(diào)整蠟塊與刀至合適位置，刀刃與蠟塊表面呈5度角,。

2．切片多使用輪轉(zhuǎn)式切片機(jī),，切片時(shí)，左手執(zhí)毛筆,，右手轉(zhuǎn)切片機(jī)轉(zhuǎn)輪,，先修出組織塊,。

3．調(diào)整切片機(jī)上的切片厚度為4~7µm，然后切片,。

4．切片可以是單張,，也可以是連續(xù)切片形成蠟帶

5．展片和撈片：

（1）直接展片法：在載玻片上滴加幾滴蒸餾水，然后把切片鋪在小滴上面,，用酒精燈在載玻片下面加熱,，待展平，傾斜載玻片,，倒棄多余水分,，同時(shí)擺正切片。

（2）溫水漂浮法：此法用展片機(jī)或者用恒溫水浴箱,，先使水溫保持在45~50℃,，用左手拿毛筆輕輕托起切片，用右手用眼科鑷子夾起切片的一角,，正面向上輕輕平鋪放置于展片器的水面上,，動(dòng)作要輕快，切好的石蠟切片漂浮在溫水中受熱后及在表面張力的作用會(huì)自然平整地展開,，必要時(shí)可用眼科鑷輕輕拔開,，然后撈片，并及時(shí)編號(hào),。

6．展好的切片在室溫下稍微干燥后,，放在40℃恒溫烤箱中，小片組織30分鐘即可,，大的需12~24小時(shí),，烤干備用。

（三）注意事項(xiàng)

1．切片刀刃傾斜過大或過小都不能正常進(jìn)行切片,。

2．修整蠟塊時(shí)要細(xì)心,，看清楚組織在蠟塊中的位置，以免將需要的組織修掉,。

3．連續(xù)轉(zhuǎn)動(dòng)切片機(jī)的轉(zhuǎn)輪時(shí),，速度要均勻，不能時(shí)快時(shí)慢,，以免切片厚薄不一,。

4．使用輪轉(zhuǎn)式切片機(jī)切片時(shí)，是由下向上切,，為得到定然整的切片,，防止組織出現(xiàn)刀紋裂縫，應(yīng)將組織硬、脆難切的部分放在上端,，如皮膚應(yīng)將表皮部分向上,，腸胃等組織應(yīng)將漿膜面面朝上。

5．用展片器展片時(shí),，水溫應(yīng)根據(jù)使用的石蠟熔點(diǎn)進(jìn)行了調(diào)整,，一般低于石蠟熔點(diǎn)10~15℃；撈片的時(shí)候動(dòng)作要輕,、稍快,。動(dòng)作太大容易出現(xiàn)氣泡。如果沒有展片器可以用溫水浴鍋來代替,。

6．單個(gè)切片要擺到載玻片的1/3與2/3交界處,；連續(xù)切片的粘片順序一般是從左到右，組織切片較小是,，可以并列粘貼2~3條蠟帶,。

7．烤片的溫度不宜過高；烤片的時(shí)間要合適,。腦組織要待稍微晾干一些后,，才能烤片，否則容易產(chǎn)生氣泡影響染色和觀察,。