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一、技術(shù)簡介

細(xì)胞黏附主要用于判定細(xì)胞在經(jīng)過各種藥物處理,、基因轉(zhuǎn)染,、敲除或培養(yǎng)條件改變后，細(xì)胞的黏附能力改變情況,。通常可分為兩類,，即細(xì)胞與細(xì)胞黏附和細(xì)胞與基質(zhì)黏附,。細(xì)胞黏附性的改變?cè)谀[瘤轉(zhuǎn)移過程中也發(fā)揮著重要作用。惡性腫瘤具有從原發(fā)瘤分離及在體內(nèi)擴(kuò)散的能力,，提示這些細(xì)胞在相互識(shí)別及黏附機(jī)制方面發(fā)生了改變,。

二、實(shí)驗(yàn)流程

1. 用無血清培養(yǎng)基RPMI-1640將Matrigel（人工基底膜膠）配制成0.04μg/μl的人工基底膜膠備用,，96孔板每孔中鋪Matrigel 2μg,，放于超凈臺(tái)中風(fēng)干過夜。

2. 在96孔板加入適量無血清RPMI-1640細(xì)胞培養(yǎng)液(或PBS或生理鹽水),，放置60-90分鐘,。3. 洗去多余的膠，取培養(yǎng)的腫瘤細(xì)胞以1×104/孔接種在鋪膠的96孔板中,，設(shè)3個(gè)重復(fù)孔,，放入37攝氏度5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h,。

4. 加藥和模型藥，培養(yǎng)48h,。

5. MTT檢測：吸掉液體,，然后每孔加入MTT 10μl，繼續(xù)培養(yǎng)4h,，吸掉液體,，每孔加入二甲基亞砜(DMSO)100μl，在振蕩器上振蕩5-10分鐘,，在顯微鏡下觀察無晶體,，然后在酶標(biāo)儀490nm波長讀取數(shù)值。

三,、服務(wù)說明及結(jié)果

1. 客戶提供：藥物,。

2. 公司提供：基本實(shí)驗(yàn)步驟、細(xì)胞粘附圖片,、MTT檢測結(jié)果,。

3. 實(shí)驗(yàn)周期：10個(gè)工作日。