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熒光素酶( Luciferase )是生物體內(nèi)催化熒光素(luciferin )或脂肪醛(firefly aldehyde)氧化發(fā)光的一類酶的總稱,。雙熒光素酶報(bào)告基因系統(tǒng)是以熒光素(luciferin)為底物來檢測(cè)螢火蟲熒光素酶活性的一種報(bào)告系統(tǒng),通常采用第二個(gè)報(bào)告基因(如海腎熒光素酶報(bào)告基因)來減少實(shí)驗(yàn)的變化因素,。熒光素酶可以催化熒光素氧化成氧化熒光素,在熒光素氧化的過程中，會(huì)發(fā)出生物熒光,。然后可以通過熒光測(cè)定儀測(cè)定熒光素氧化過程中釋放的生物熒光,。熒光素和熒光素酶這一生物發(fā) 光體系，可以極其靈敏,、高效地檢測(cè)基因的表達(dá),。是檢測(cè)轉(zhuǎn)錄因子與目的基因啟動(dòng)子區(qū)DNA相互作用的一種檢測(cè)方法。
實(shí)驗(yàn)流程:
1.構(gòu)建表達(dá)載體和熒光素酶報(bào)告基因表達(dá)載體,。
2.細(xì)胞培養(yǎng)及質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染,。
3.熒光素酶活性檢測(cè)。