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甘油三酯檢測(cè)實(shí)驗(yàn)服務(wù)意義:
甘油三酯(TG)是脂質(zhì)的組成成分,,是甘油和3個(gè)分子長(zhǎng)鏈脂肪酸所形成的脂肪分子。脂質(zhì)組成復(fù)雜,,除甘油三酯外,,還包括膽固醇、磷脂,、脂肪酸以及少量其他脂質(zhì),。正常情況下,血漿中的甘油三酯保持著動(dòng)態(tài)平衡,。血漿中的甘油三酯的來(lái)源主要有兩種:①外源性:由食物中攝取的脂肪于腸道內(nèi),,在膽汁酸、脂酶的作用下被腸黏膜吸收,,在腸黏膜上皮細(xì)胞內(nèi)合成甘油三酯,。②內(nèi)源性:體內(nèi)自身合成的甘油三酯主要在肝臟,其次為脂肪組織,。甘油三酯的主要功能是供給與儲(chǔ)存能源,,還可固定和保護(hù)內(nèi)臟。
甘油三酯檢測(cè)實(shí)驗(yàn)服務(wù)樣本處理:
①,、血清(漿): 直接測(cè)定,,如超過(guò)線性范圍用生理鹽水稀釋后測(cè)定。
②,、培養(yǎng)液樣本:吸取培養(yǎng)液,1000 轉(zhuǎn)/分,,離心10分鐘,,取上清測(cè)定,。
⑧、組織樣本:準(zhǔn)確稱取組織重量,按重量(g):體積(m)=1: 9的比例,,加入9倍體積的勻漿介質(zhì),,冰水浴條件下機(jī)械勻漿,2500轉(zhuǎn)1分,離心10分鐘,,取上清液待測(cè),。
④、細(xì)胞樣本:
A.細(xì)胞收集:將制備好的細(xì)胞懸液取出,,1000轉(zhuǎn)/分,, 離心10分鐘,棄上清液,,留細(xì)胞沉淀;用等滲緩沖
液(*0.1mo/L,、pH7~74磷酸鹽緩沖液)清洗1~2次,同樣1000轉(zhuǎn)/分,,離心10分鐘,,棄上清液, .留細(xì)胞沉淀;
B、細(xì)胞破碎:加入0.2~0.3ml的勻漿介質(zhì)(*0.1 mo/L,、pH7~7.4磷酸鹽緩沖液或生理鹽水)進(jìn)行勻漿,冰水浴條件下超聲破碎(功率:300W,3~5秒/次,間隔30秒,,重復(fù)3~5次)或手動(dòng)勻漿,制備好的勻漿液不離心待測(cè),。也可采用裂解液裂解(*TritonX-100,,1~2%,裂解 30~40分鐘),裂解好的液體不離心直接測(cè)定。
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