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伊萊博生物科技(上海)有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第6年

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chip蛋白實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)
  • chip蛋白實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)

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更新時(shí)間:2024-12-26 21:00:07

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chip蛋白實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)
研究蛋白質(zhì)和DNA在染色質(zhì)環(huán)境下的相互作用是闡明真核生物基因表達(dá)機(jī)制的基本途徑

chip蛋白實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)

上海伊萊博生物科技有限公司成立于2005年,,公司位于上海長江軟件園,實(shí)驗(yàn)室面積600多平方米,。公司目前具備較好的的生物學(xué),、醫(yī)學(xué)技術(shù)服務(wù)平臺(tái),能夠?yàn)閺V大客戶提供醫(yī)學(xué)科研樣本檢測(cè),、合作研究,、開發(fā)及生產(chǎn)服務(wù)。

chip蛋白實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)操作流程: 
1 ,、樣品準(zhǔn)備與交聯(lián) 
細(xì)胞收集后,,用37%的formaldehyde處理細(xì)胞,交聯(lián)核酸與DNA結(jié)合蛋白,;
2. 超聲打斷染色質(zhì) 
裂解細(xì)胞,,用Bioruptor將染色質(zhì)超聲破碎成200-1000bp片斷;將片段分為兩份,,一份用于免疫共沉淀,,一份用于對(duì)照。
3 ,、免疫共沉淀 (IP) 
取B步驟所得一份片斷與ChIP特異抗體結(jié)合進(jìn)行免疫共沉淀,,利用免疫磁珠法富集抗體復(fù)合物。
4 ,、解交聯(lián)及純化 DNA 
將富集的DNA/蛋白復(fù)合物解交聯(lián)釋放DNA的片段,,并進(jìn)行純化(IP DNA);B步驟所得用于對(duì)照(Input DNA)的片斷作不進(jìn)行IP實(shí)驗(yàn),,但也要解交聯(lián)并純化,。
5 、 DNA 段 PCR 擴(kuò)增 
針對(duì)ChIP DNA, Input DNA及對(duì)照DNA的目的片段設(shè)計(jì)特異性引物并進(jìn)行熒光定量PCR擴(kuò)增,。
 6 ,、結(jié)果分析 
%Input=2(CtInput-CtChIP)×Fd×
Fold Enrichment = [%(ChIP/Input)] / [%( Negative control/Input)] 

如果你想了解本公司的Chip蛋白實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)或者其他產(chǎn)品,,咨詢,我們將熱情為您服務(wù),。

 

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