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當(dāng)前位置:> 供求商機> TMT組學(xué)技術(shù)服務(wù)
TMT組學(xué)技術(shù)服務(wù)簡單介紹:iTRAQ和TMT的技術(shù)原理一樣,,所不同的是二者的分子結(jié)構(gòu)有差異,。與SILAC相比(標(biāo)記蛋白質(zhì)),iTRAQ和TMT是對肽段進(jìn)行標(biāo)記的,。依據(jù)iTRAQ/TMT標(biāo)簽的質(zhì)量數(shù)差異,,通過MS實現(xiàn)對多組樣品中的蛋白質(zhì)進(jìn)行相對定量:SILAC是通過一級MS( MSl)對蛋白質(zhì)進(jìn)行定量,,而iTRAQ/TMT是通過二級MS( MS/MS.MS2)進(jìn)行定量的jiTRAQ/TMT能兼容來源的蛋白質(zhì)樣品,并且能同時分析多達(dá)8-10組的樣品,,分析通量高,。
TMT組學(xué)技術(shù)服務(wù)實驗步驟:
1、分別提取蛋白質(zhì)并定量,;
2,、Trypsin分別對蛋白進(jìn)行酶解,提取肽段,;
3,、用不同質(zhì)量數(shù)的iTRAQ/TMT標(biāo)簽分別對肽段樣品進(jìn)行標(biāo)記:
4、標(biāo)記完成后,,混合樣品,,用SCX進(jìn)行組分分離(15-20組分);
5,、對每個組分進(jìn)行LC-MS分析:
6,、蛋白質(zhì)鑒定與定量分析,篩選差異表達(dá)的蛋白,;
7,、生物學(xué)實驗驗證(Western blot,EUSA等):
技術(shù)優(yōu)勢
1,、高通量,,能同時進(jìn)行多達(dá)8-10組樣品蛋白質(zhì)組的定性與定量分析;
2,、兼容來源的樣品(動植物組織,、細(xì)菌、血液等),;
3,、實驗周期短。
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