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定量蛋白組學(xué)服務(wù)背景簡介：

  SILAC( Stable Isotope  Labeling with   Amino acids in  Cell culture)技術(shù)是依據(jù)細(xì)胞生長對必需氨基酸的依賴原理,，利用穩(wěn)定同位素標(biāo)記( 13C,，15N，2H)的必需氨基酸對細(xì)胞蛋白質(zhì)組進(jìn)行代謝標(biāo)記的方法,；13C,15N,2H是穩(wěn)定同位素,，沒有放射性,，因此可以在常規(guī)條件下進(jìn)行試驗。

定量蛋白組學(xué)服務(wù)

    Arg(R),、Lys(K),、Leu(L)是SILAC常用的氨基酸。將(13C,，15N,，2H)等穩(wěn)定同位素標(biāo)記的R、K,、L加入細(xì)胞培養(yǎng)基中,，在細(xì)胞進(jìn)行蛋白質(zhì)合成時，這些穩(wěn)定同位素標(biāo)記的氨基酸自然被“摻入”到蛋白質(zhì)中,。通過>6代的細(xì)胞增殖,，整個細(xì)胞的蛋白質(zhì)組會被穩(wěn)定同位素氨基酸”標(biāo)記”；SILAC“標(biāo)記”了蛋白質(zhì)與“未標(biāo)記”的蛋白質(zhì)（普通培養(yǎng)基培養(yǎng)）存在數(shù)目的質(zhì)量差異,，該質(zhì)量差異在后續(xù)LC-MS的一級質(zhì)譜( MSl)中呈現(xiàn)一對同位素質(zhì)譜峰,，通過質(zhì)譜峰的信號強度能實現(xiàn)對2組樣品中每一個蛋白質(zhì)表達(dá)水平的相對定量，終能確定蛋白質(zhì)表達(dá)水平差異（差異蛋白質(zhì)組學(xué)分析）和區(qū)分特異性和非特異性相互作用（蛋白質(zhì)相互作用分析）,；同時通過二級質(zhì)譜( MS/MS,，MS2)實現(xiàn)對樣品中蛋白質(zhì)的鑒定。

  SILAC技術(shù)結(jié)合LC-MS能同時實現(xiàn)對2組樣品中蛋白質(zhì)的定性和定量分析,。實驗技術(shù)“高,、大、上“,，定量,，通過定墨信息能直接反映出樣品之間的蛋白質(zhì)表達(dá)水平差異，便于快速找到感興趣的目標(biāo)分子,。同時,，利用SILAC技術(shù)，能明顯提高文章的檔次,。