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更新時間：2024-11-15 21:00:08

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實(shí)驗(yàn)服務(wù): 特殊染色類器官培養(yǎng)技術(shù) 蛋白實(shí)驗(yàn)檢測服務(wù) 病理實(shí)驗(yàn)檢測服務(wù) 動物實(shí)驗(yàn)檢測服務(wù) 分子實(shí)驗(yàn)外檢測服務(wù) 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)檢測服務(wù)

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產(chǎn)品簡介詳細(xì)介紹

細(xì)胞培養(yǎng)條件下穩(wěn)定同位素標(biāo)記技術(shù)（Stable isotope labeling with amino acids in cell culture,，SILAC），利用含輕、中或重型同位素標(biāo)記的必需氨基酸（主要是Lys和Arg）培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞,，來標(biāo)記細(xì)胞內(nèi)新合成的蛋白質(zhì)，一般培養(yǎng)5-6代,，細(xì)胞中的蛋白質(zhì)將都被同位素標(biāo)記,。

背景簡介：SILAC( Stable Isotope Labeling with Amino acids in Cell culture)技術(shù)是依據(jù)細(xì)胞生長對必需氨基酸的依賴原理，利用穩(wěn)定同位素標(biāo)記( 13C，15N,，2H)的必需氨基酸對細(xì)胞蛋白質(zhì)組進(jìn)行代謝標(biāo)記的方法,；13C,15N,2H是穩(wěn)定同位素，沒有放射性,，因此可以在常規(guī)條件下進(jìn)行試驗(yàn),。

Arg(R)、Lys(K),、Leu(L)是SILAC常用的氨基酸,。將(13C，15N,，2H)等穩(wěn)定同位素標(biāo)記的R,、K、L加入細(xì)胞培養(yǎng)基中,，在細(xì)胞進(jìn)行蛋白質(zhì)合成時,，這些穩(wěn)定同位素標(biāo)記的氨基酸自然被“摻入”到蛋白質(zhì)中。通過>6代的細(xì)胞增殖,，整個細(xì)胞的蛋白質(zhì)組會被穩(wěn)定同位素氨基酸”標(biāo)記”,；

SILAC“標(biāo)記”了蛋白質(zhì)與“未標(biāo)記”的蛋白質(zhì)（普通培養(yǎng)基培養(yǎng)）存在數(shù)目的質(zhì)量差異，該質(zhì)量差異在后續(xù)LC-MS的上等質(zhì)譜( MSl)中呈現(xiàn)一對同位素質(zhì)譜峰,，通過質(zhì)譜峰的信號強(qiáng)度能實(shí)現(xiàn)對2組樣品中每一個蛋白質(zhì)表達(dá)水平的相對定量,，終能確定蛋白質(zhì)表達(dá)水平差異（差異蛋白質(zhì)組學(xué)分析）和區(qū)分特異性和非特異性相互作用（蛋白質(zhì)相互作用分析）；同時通過二級質(zhì)譜( MS/MS,，MS2)實(shí)現(xiàn)對樣品中蛋白質(zhì)的鑒定,。

SILAC技術(shù)結(jié)合LC-MS能同時實(shí)現(xiàn)對2組樣品中蛋白質(zhì)的定性和定量分析。實(shí)驗(yàn)技術(shù)“高,、大,、上“，通過定墨信息能直接反映出樣品之間的蛋白質(zhì)表達(dá)水平差異,，便于快速找到感興趣的目標(biāo)分子,。同時，利用SILAC技術(shù),，能明顯提高文章的檔次,。

SILAC氨基酸對照表：