肺纖維化動物模型服務(wù)構(gòu)建

一,、肺纖維化背景簡介

肺纖維化（pulmonary fibrosis，PF)是肺組織異常修復(fù)造成不可逆損傷的一類疾病,，以炎癥和細胞外基質(zhì)沉積為特征,，呈進展性和致死性的彌漫性肺間質(zhì)疾病，其中,，特發(fā)性肺間質(zhì)肺纖維化(idiopathic pulmonary fibrosis,，IPF)發(fā)病率最高,。

二、肺纖維化動物模型簡介

構(gòu)建一個理想的肺纖維化模型,，不僅有助于進一步篩選肺纖維化生物標志物,，同時也為深入研究肺纖維化發(fā)病機制及動物臨床治療肺纖維化和研發(fā)新藥提供科學(xué)基礎(chǔ)。

三,、肺纖維化動物模型服務(wù)構(gòu)建方法

1. 實驗動物

C57小鼠   6周齡

2. 實驗材料

C57小鼠,，blms，注射器

3. blms誘導(dǎo)模型制備流程

（1）小鼠按照麻醉劑劑量麻醉后固定,，呈仰臥位姿勢,，氣管居中，暴露頸部,，剪毛備皮,，無水乙醇消毒后沿頸部中線開口（開口大小：0.5-1cm左右）緩慢鈍性分離至氣管,，此時需要輕柔操作,，減少因手術(shù)操作造成的氣管損傷。

（2）使用注射器（1ml或者微量注射器,，胰島素針不失為好的選擇）,，針頭幾乎平行于氣管平面，經(jīng)氣管軟骨環(huán)間隙朝向心端插入氣管內(nèi),，回抽無阻力,，則注入少量的blms溶液（不超過0.2 ml/只，肺內(nèi)大量積液會導(dǎo)致動物的死亡）,。

（3）注射完畢后,，縫合傷口，后將動物直立1-3 min,，適度左右轉(zhuǎn)動,，并輕輕按摩小鼠胸部，保證blms在肺內(nèi)均勻分布,，動物清醒后常規(guī)飼養(yǎng),。（3天左右即可出現(xiàn)損傷，體重降低等癥狀）28d后收集樣本,。

4.模型鑒定

4.1 HE染色觀察肺組織肺泡炎程度

肺組織肺泡炎評分：無肺泡炎計1 分,，輕、中,、重度肺泡炎分別計2,、3、4 分。輕度肺泡炎主要表現(xiàn)為單核細胞浸潤,，肺泡間隔增寬但結(jié)構(gòu)正常,，浸潤局限于近胸膜部，受累面積小于全肺的20 %,；中度肺泡炎受累面積占全肺20 % ~ 50 %,；重度肺泡炎受累面積占全肺的50 % 以上，偶見肺泡腔內(nèi)有單核細胞及出血造成實變,。

4.2 Masson染色觀察肺組織肺纖維化程度

肺纖維化程度評分：無纖維化計1 分,，輕、中,、重度肺纖維分別計2,、3、4 分,。輕度纖維化主要累及胸膜及胸膜下肺間質(zhì),，肺泡結(jié)構(gòu)紊亂，受累面積小于20 %,；中度纖維化受累面積占全肺的20 %~50 %,；重度纖維化受累面積占全肺的50 % 以上，肺實質(zhì)紊亂,，并有融合,，可見大小不等的囊氣腔。

四,、小結(jié)

在PE動物模型中,，BLM造模可行性好,，研究性強,，能夠重視一般PE，其用于IPE發(fā)病機制的研究和有效治療藥物的研發(fā)具有很大的實用價值,。但是BPF動物模型與臨床IPE相比仍存有一定差異，在實驗研究應(yīng)用方面也有一定局限性,，因此需加強對BLM作用機制及IPE的研究,，進一步明確其相關(guān)性。

五,、參考文獻

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