RT—PCR（Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction）是將RNA的反轉(zhuǎn)錄（RT）和cDNA的聚合酶鏈式擴增（PCR）相結(jié)合的技術(shù)。首先經(jīng)反轉(zhuǎn)錄酶的作用,，從RNA合成cDNA,，再以cDNA為模板，在DNA聚合酶作用下擴增合成目的片段,。RT—PCR技術(shù)靈敏而且用途廣泛,，可用于檢測細胞中基因表達水平、細胞中RNA病毒的含量和直接克隆特定基因的cDNA序列,。作為模板的RNA可以是總RNA,、mRNA或體外轉(zhuǎn)錄的RNA產(chǎn)物。無論使用何種RNA,，關(guān)鍵是確保RNA中無RNA酶和基因組DNA的污染,。用于反轉(zhuǎn)錄的引物可視實驗的具體情況選擇隨機引物、Oligo dT及基因特異性引物中的一種,。對于短的不具有發(fā)夾結(jié)構(gòu)的真核細胞mRNA,，3種都可。