實驗步驟

標記六孔板

用marker筆在六孔板底部畫平行線,，平行線之間的距離0.5cm,，為了保證后續(xù)拍照位置是相同的,；

鋪板

細胞重懸鋪板,，密度控制在第二天長滿，若過夜后細胞wq長滿,，也可以適當延長培養(yǎng)時間,，但如果細胞密度已經(jīng)很大，盡量重新鋪板,，因為可能過一天后細胞太滿,，會導致細胞狀態(tài)逐漸變差，后續(xù)細胞可能不遷移而是凋亡,；

制造劃痕

第二天用直尺比著使用10ul槍頭制造劃痕,，劃痕方向與標志線垂直，最好保持力度一致,，盡量一次性劃完,，然后PBS沖洗3次，洗去漂浮的細胞

為了減少細胞增殖所引起的假陽性結果，降低細胞增殖對實驗結果的影響,，將wq培養(yǎng)基換成無血清培養(yǎng)基和低血清培養(yǎng)基（FBS＜2%繼續(xù)培養(yǎng)細胞）,；

拍照

拍照前最好用PBS沖洗3次，一般認為24h為細胞的一個周期,，所以檢測時間最好不要超過一個周期的時間,，按照6孔板背后畫線的垂直方向劃痕