1.Fluo/Am儲存液配制：將Fluo/Am溶于DMSO，配成終濃度為2mmol/L的儲存液,，分裝,，-70度凍存。
2.懸浮細胞染色：收集細胞并調整細胞濃度至2*10^6個/ml,，加Fluo/Am至終濃度為5-10umol/L,置于,，5%CO2,。37度避光，孵育30-60min,，其間輕輕振蕩幾次,，并設置陰性對照（不加Fluo/Am）。
3.貼壁細胞染色：以5*10^5個細胞種植于24孔培養(yǎng)板中,，置于5%CO2,。37度培養(yǎng)一段時間，加入Fluo/Am至終濃度為5-10umol/L,，置于5%CO2,。37度避光，孵育30-60min,。其間輕輕振蕩幾次,，并設置陰性對照。
4.取出細胞或消化細胞,，離心1500r/min 10min,，去除多余染料，再用無鈣緩沖液沖洗PBS反復離心洗滌2次,，最后用無鈣PBS重懸至0.5ml,。
5.進行流式檢測分析
結果分析：用488mm激發(fā)，F(xiàn)LI-H熒光通道收集熒光信號,，收集1*10^4個細胞,，細胞內鈣的濃度用平均熒光表示。