流式單標(biāo)步驟通常包括以下幾個關(guān)鍵環(huán)節(jié)：

 細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備。首先,，需要收集目標(biāo)細(xì)胞樣品,，如細(xì)胞懸液或組織細(xì)胞液，以獲得細(xì)胞單層的懸浮液,。然后,，用PBS洗滌細(xì)胞樣品，以去除細(xì)胞培養(yǎng)基中的細(xì)胞培養(yǎng)液和廢棄物,。¹00001. 制備單標(biāo)熒光染色試劑,。科研人員選擇的單標(biāo)熒光染色試劑是一種粘附于目標(biāo)細(xì)胞表面的抗體探針,，這些抗體可以特異性地與目標(biāo)抗原結(jié)合,，并發(fā)出熒光信號。常用的單標(biāo)染色試劑有FITC（熒光素異硫氰酸酯）,、PE（葡萄糖相映射學(xué)）等,。

 染色反應(yīng)。將制備好的單標(biāo)染色試劑加入之前準(zhǔn)備好的細(xì)胞樣品中,，進行充分的染色反應(yīng),。染色結(jié)束后，用PBS洗滌細(xì)胞樣品,，以去除未結(jié)合的熒光抗體,。

 流式細(xì)胞儀分析。使用流式細(xì)胞儀對染色實驗進行分析,，得到關(guān)于細(xì)胞表面抗原的熒光信號,。流式細(xì)胞儀可以通過激光照射懸浮細(xì)胞，檢測細(xì)胞表面與標(biāo)記抗體結(jié)合的熒光強度,。通過流式細(xì)胞儀的檢測系統(tǒng),，可以同時分析多個參數(shù)，如細(xì)胞大小,、熒光染色強度和細(xì)胞表面抗原的表達水平,。²

 數(shù)據(jù)分析與報告。通過流式細(xì)胞儀獲得的原始數(shù)據(jù)可以使用不同的軟件進行分析，如FlowJo,、Kalisto和Cytobank,。這些軟件可以檢測和計算細(xì)胞表面抗原的表達水平,，并生成圖形和統(tǒng)計結(jié)果,。