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所 在 地上海市
更新時間:2024-06-17 13:31:00瀏覽次數(shù):583次
聯(lián)系我時,,請告知來自 化工儀器網(wǎng)序列分析表明,,至少有1/3的人類基因與miRNA調(diào)控相關(guān),,而且越來越多的試驗證據(jù)表明miRNA還有很多功能未被發(fā)現(xiàn)。研究基因的功能通常是將其從基因組中敲除,,然后觀察敲除前后的變化,,但在破譯miRNA的功能,我們一般不會采用這種策略,,而是通過增強(qiáng)或減弱該miRNA的表達(dá)來鑒定其功能,。
miRNA mimic能模擬細(xì)胞中內(nèi)源性成熟miRNA的高水平表達(dá),以增強(qiáng)內(nèi)源性miRNA的調(diào)控作用,,是miRNA功能研究的一大利器,。miRNA mimic是一種簡單高效的miRNA研究工具,只需用轉(zhuǎn)染試劑包裹即可轉(zhuǎn)染進(jìn)入細(xì)胞,,無需構(gòu)建載體的繁瑣操作,,無需病毒防護(hù)方面的擔(dān)憂,,用轉(zhuǎn)染對照即可觀察其轉(zhuǎn)染效率。
miRNA mimic的轉(zhuǎn)染效果,,可從靶基因的RNA表達(dá)水平,,蛋白表達(dá)水平,細(xì)胞功能等方面檢測,。這些實驗?zāi)軌颢@得miRNA的生物學(xué)功能數(shù)據(jù),,及應(yīng)用于miRNA的靶基因驗證方面。通常這些實驗涉及到miRNA mimic的轉(zhuǎn)染,,或者與報告基因載體共轉(zhuǎn),。
在MEF細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)染miRNA表達(dá)載體(2ug/mL)或者miRNA mimic(50nM),48h后檢測miRNA的表達(dá),,結(jié)果顯示,,表達(dá)載體僅能實現(xiàn)10倍的過表達(dá),而miRNA mimic可實現(xiàn)600倍以上的過表達(dá),。對于短期(<1周)的miRNA功能獲得性細(xì)胞研究而言,,miRNA mimic是zhd選擇。
從生物學(xué)機(jī)理上來說,,miRNA有成為腫瘤標(biāo)志物的優(yōu)勢,它是腫瘤細(xì)胞主動分泌的,,隨著腫瘤細(xì)胞的生成,、凋零,miRNA的表達(dá)量一直在變化,,所以每種miRNA的表達(dá)量代表了在某一刻人類體內(nèi)健康或者疾病的信息,。 MiRXES在人體這2000多種miRNA中,他們找出了與胃癌高度相關(guān)的12種miRNA,,當(dāng)人體中出現(xiàn)胃癌細(xì)胞時,,這12種miRNA在血液中的濃度會出現(xiàn)異常。
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