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更新時間:2024-06-17 13:31:00瀏覽次數(shù):496次
聯(lián)系我時,,請告知來自 化工儀器網(wǎng)序列分析表明,,至少有1/3的人類基因與miRNA調(diào)控相關(guān),而且越來越多的試驗證據(jù)表明miRNA還有很多功能未被發(fā)現(xiàn),。研究基因的功能通常是將其從基因組中敲除,,然后觀察敲除前后的變化,但在破譯miRNA的功能,我們一般不會采用這種策略,,而是通過增強或減弱該miRNA的表達來鑒定其功能,。
miRNA mimic能模擬細胞中內(nèi)源性成熟miRNA的高水平表達,以增強內(nèi)源性miRNA的調(diào)控作用,,是miRNA功能研究的一大利器,。miRNA mimic是一種簡單高效的miRNA研究工具,,只需用轉(zhuǎn)染試劑包裹即可轉(zhuǎn)染進入細胞,無需構(gòu)建載體的繁瑣操作,無需病毒防護方面的擔憂,,用轉(zhuǎn)染對照即可觀察其轉(zhuǎn)染效率,。
miRNA mimic的轉(zhuǎn)染效果,,可從靶基因的RNA表達水平,,蛋白表達水平,細胞功能等方面檢測,。這些實驗能夠獲得miRNA的生物學功能數(shù)據(jù),,及應用于miRNA的靶基因驗證方面。通常這些實驗涉及到miRNA mimic的轉(zhuǎn)染,,或者與報告基因載體共轉(zhuǎn),。
在MEF細胞內(nèi)轉(zhuǎn)染miRNA表達載體(2ug/mL)或者miRNA mimic(50nM),48h后檢測miRNA的表達,,結(jié)果顯示,,表達載體僅能實現(xiàn)10倍的過表達,而miRNA mimic可實現(xiàn)600倍以上的過表達,。對于短期(<1周)的miRNA功能獲得性細胞研究而言,,miRNA mimic是zhd選擇。
從生物學機理上來說,,miRNA有成為腫瘤標志物的優(yōu)勢,,它是腫瘤細胞主動分泌的,隨著腫瘤細胞的生成,、凋零,,miRNA的表達量一直在變化,所以每種miRNA的表達量代表了在某一刻人類體內(nèi)健康或者疾病的信息,。 MiRXES在人體這2000多種miRNA中,,他們找出了與胃癌高度相關(guān)的12種miRNA,當人體中出現(xiàn)胃癌細胞時,,這12種miRNA在血液中的濃度會出現(xiàn)異常,。
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