將質(zhì)粒 DNA 導(dǎo)入細(xì)菌的過(guò)程稱為轉(zhuǎn)化（ Transformation ）。此感受態(tài)細(xì)菌細(xì)胞在 CaCl 2 低滲溶液中膨脹為球狀（感受態(tài)細(xì)菌的制備,，見(jiàn)前）,。質(zhì)粒 DNA 與 CaCl 2 形成抗 DNase 羥基 - 磷酸鈣復(fù)合物黏附于細(xì)菌表面，經(jīng) 42℃ 短時(shí)間熱沖擊處理,，促進(jìn)細(xì)胞吸收 DNA 復(fù)合物,。在豐富培養(yǎng)基上生長(zhǎng)數(shù)小時(shí)后，球狀細(xì)胞復(fù)原并分lie增殖,。被轉(zhuǎn)化的細(xì)菌中,，外源基因得到表達(dá),。在選擇性培養(yǎng)平板上，可選出所需的轉(zhuǎn)化子（即含有質(zhì)粒 DNA 的細(xì)菌）,。鈣處理的感受態(tài)細(xì)胞,，一般每微克 DNA 能獲得 10 5 ～ 10 6 個(gè)轉(zhuǎn)化子。除化學(xué)方法轉(zhuǎn)化細(xì)菌外,，還有電穿孔法（ Electroporation ）,，其轉(zhuǎn)化率可高達(dá) 10 9 ～ 10 10 個(gè)轉(zhuǎn)化子 /μg 質(zhì)粒 DNA 。

二,、實(shí)驗(yàn)器材

1.培養(yǎng)皿

2.恒溫培養(yǎng)箱

三,、試劑

1.LB 培養(yǎng)基

2.選擇性 LB 瓊脂培養(yǎng)平板（含氨芐qms，終濃度為 50μg/ml ）

3.氨芐qms 100 mg/ml

4.宿主細(xì)菌：經(jīng) 100 mmol/L CaCl 2 處理的感受態(tài)細(xì)菌 DH5α

四,、操作步驟

1,、取50μL大腸桿菌感受態(tài)細(xì)胞，加入適量質(zhì)粒（體積不得超過(guò)4μL）冰浴30min后42℃熱激90s ,，馬上放回冰上,，冰浴2min ；

2,、加400μLLB培養(yǎng)基,，于37℃搖床慢搖振蕩培養(yǎng)45-60min；

3,、取50-100μL涂在含有氨芐qms（100μg/mL）的LB固體培養(yǎng)基上,，37℃倒置培養(yǎng)過(guò)夜。