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光老化模型構建模式動物
品系SPF級ICR小鼠,,健康,,雄性,6~8W,。
來源UVA,,UVB紫外導致皮膚老化
實驗分組實驗分六組:正常對照組、模型組,、陽性藥組,、受試藥組三個劑量組。
實驗周期4-6 weeks
光老化模型構建造模方式
雄性ICR小鼠,,年齡約6周,。小鼠在正常溫度下(23±2℃)濕度(55%±10%)和光照(12小時光照/ 12小時黑暗,,無紫外線照射)喂養(yǎng)。喂養(yǎng)一周,,等小鼠適應了環(huán)境,,用8%硫化鈉在小鼠的背部剃出超過2厘米x3厘米的脫毛區(qū)。
紫外照射方法:2根UVB燈管和4根UVA燈管(40W,,北京電光源研究所)并列穿插安放至自制福照箱中作為紫外福照光源,。利用紫外照度儀(UV-B紫外輻照計、UV-A紫外輻照計 北京師范大學光電儀器廠 )測定UVA和UVB的輻射強度,。造模前,,UV燈管預熱10 min,待光源穩(wěn)定后將實驗鼠放入自制的鼠籠內(使小鼠間不能相互攀爬,、站立),,并放入箱照箱內,鼠籠與UV燈管相距30 cm,,根據(jù)預試所得最小紅斑劑量(MED)及光源強度調節(jié)福照時間,,照射期間用排氣扇降低箱體溫度。第1周按1個MED的劑量進行照射,,每周照射3次,,往后每周照射劑量比前周遞增1個MED,直至第4周4個MED為止,,之后保持4個MED直至第8周實驗結束,。模型組小鼠背部皮膚出現(xiàn)明顯增厚、皺紋粗深,、松弛等光老化皮膚表征,,說明小鼠皮膚光老化造模成功。
MED測定方法:對預實驗小鼠分別采用30mJ/cm2,、60mJ/cm2,、90mJ/cm2、120mJ/cm2,、150mJ/cm2,、180mJ/cm2的紫外福照劑量對其背部皮膚進行輻照,照射后24h觀察小鼠背部皮膚出現(xiàn)肉眼可見紅斑所需劑量為最小紅斑劑量(MED),。
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