過氧化氫誘導(dǎo)動物模型造模方法

2.1,、原理：根據(jù)黑色素不穩(wěn)定， 易受強(qiáng)氧化劑過氧化氫破壞的特性,， 破壞皮膚黑色素,， 使皮膚脫色，建立白dian風(fēng)模型,。

2.2,、方法：體重 200 g 左右， 花黑色豚鼠,， 雌雄各半,， 背部脫毛， 脫毛面積約 4 cm × 4 cm,。脫毛后用生理鹽水清洗脫毛局部,， 局部脫毛區(qū)均無損傷。在脫毛區(qū)涂 5% 過氧化qing溶液 1 mL,， 每天2 次,， 上午和下午各 1 次 ( 每次 0. 5 mL， 每次先涂0. 25 mL,，10 min后再同量涂 1 次) ,， 連續(xù) 50 d， 可制備豚鼠白dian風(fēng)模型,。在此期間,， 各組豚鼠每 3 d 脫毛 1 次。本模型可持續(xù) 50 -60 d,。

3,、莫諾苯宗乳膏脫色法制備小鼠白dian風(fēng)模型

3.1、原理：通過 TYR與活性氧自由基( ROS) 的相互作用,， 引起系統(tǒng)性的自身免疫反應(yīng),， 并作用于黑素細(xì)胞， 從而導(dǎo)致色素脫失,， 與職業(yè)暴露性的白dian風(fēng)無明顯差異,。

3.2、方法 ：C57BL /6 小鼠,， 雄性 ( 雌性) ,， 體重20 g左右， 脫去背部黑色毛,， 脫毛面積約 2 cm ×2 cm,， 脫毛后用生理鹽水清洗脫毛局部， 局部脫毛區(qū)均無損傷。每天用刮勺稍用力涂抹 40% 莫諾苯宗乳膏 50 mg,， 每天 1 次; 連續(xù) 50 d,， 可制備小鼠白dian風(fēng)模型。本模型可持續(xù) 50 -65 d,。

過氧化氫誘導(dǎo)動物模型建模指標(biāo)

表觀指標(biāo)：色素多少,、色素面積大小、干燥脫屑情況等為白dian風(fēng)的主要表觀指標(biāo),， 可對這些表觀指標(biāo)進(jìn)行量化積分或半量化分級,。白dian風(fēng)動物模型制備成功后， 病變局部無色素,， 皮膚呈蒼白或白斑狀,， 干燥伴明顯脫屑等。表觀指標(biāo)是臨床白dian風(fēng)的主要診斷依據(jù),， 也應(yīng)是模型判定的依據(jù),， 權(quán)重系數(shù) 0. 5。

病理指標(biāo)：局部組織病理指標(biāo)是高倍鏡下觀察含黑色素毛囊數(shù),、含黑素顆粒的細(xì)胞個數(shù) ,。白dian風(fēng)動物模型制備成功后局部組織形態(tài)觀察， 可見棘層明顯增厚,， 角質(zhì)層增生明顯; 按 Lillie 硫酸ya鐵染色法黑色素染色試劑盒說明書進(jìn)行黑色素染色,， 黑色素毛囊數(shù)顯著降低; 高倍鏡下隨意觀察基底細(xì)胞和棘層細(xì)胞顆粒， 可見有黑素顆粒的細(xì)胞個數(shù)顯著減少,。病理指標(biāo)是白dian風(fēng)動物模型病理變化的直接依據(jù),， 為直接相關(guān)指標(biāo)， 權(quán)重系數(shù) 0. 3,。

生化指標(biāo)：白dian風(fēng)的發(fā)生與體內(nèi)血清 TYR性密切相關(guān),， 與膽jian酯酶 ( CHE) ， 單 胺氧化酶( MAO) 活性,， 丙二醛( MDA) ,， 白細(xì)胞介素-6 ( IL-6)及腫瘤壞死因子-α( TNF-α) 含量等有一定關(guān)系。白dian風(fēng)動物模型制備成功后,， TYR 活性明顯下降,，CHE 和 MAO 活性升高， MDA,， IL-6 和 TNF-α 的含量均增加,。生化指標(biāo)是白dian風(fēng)動物模型發(fā)生、發(fā)展,、康復(fù)過程的機(jī)體反映,， 有一定價值,， 但特異性不高， 權(quán)重系數(shù) 0.2,。