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平板克隆形成技術(shù)服務(wù)

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更新時間:2023-10-30 17:07:00瀏覽次數(shù):830次

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平板克隆形成技術(shù)服務(wù)
當(dāng)單個細(xì)胞在體外增殖6代以上,其后代所組成的細(xì)胞群體,,稱為集落或克隆。每個克隆含有50以上的細(xì)胞,,大小在0.3-1.0mm之間,。集落形成率表示細(xì)胞的獨(dú)立生存能力,各種理化因素可能導(dǎo)致細(xì)胞的克隆形成能力發(fā)生改變,,通過計數(shù)克隆形成率可對單個細(xì)胞的增殖潛力做定量分析,,了解細(xì)胞的增殖能力和獨(dú)立生存能力。

平板克隆形成技術(shù)服務(wù)基本步驟:

1.取對數(shù)生長期的各組細(xì)胞,,分別用0.25%****消化并吹打成單個細(xì)胞并把細(xì)胞縣浮在10%胎生血清的DMEM培養(yǎng)液中衡用,。

2.將細(xì)胞具酒作梯度倍數(shù)稀釋,每組細(xì)胞分別以每川50,、100,,200個細(xì)胞的梯度密度分別接種合10mL 37"C預(yù)溫培養(yǎng)液的皿中,并輕輕轉(zhuǎn)動,,使細(xì)胞分散均勻,。置37C、5%COz及飽和溫度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)2-3周,。

3.經(jīng)常觀察,,當(dāng)培養(yǎng)皿中出現(xiàn)肉眼可見的克隆時,終止培養(yǎng),。棄去上清液,,用PBS小心浸洗2次。加甲醛固定細(xì)胞5ml固定15分鐘,。然后安固定液加適量GIMSA應(yīng)用染色液染10-30分鐘然后用流水緩慢洗去染色源,,空氣干燥。

4.將平皿倒置并疊加一張帶網(wǎng)格的適明膠片,,用肉眼直接計數(shù)克隆或在顯微鏡(低倍鏡)計數(shù)大于10個細(xì)胞的克隆數(shù),,再計算克隆形成率,克隆形成率=克隆數(shù)/接種細(xì)胞數(shù),。

平板克隆形成技術(shù)服務(wù)流程:

1)項(xiàng)目方案的確定,,包括目的細(xì)胞、 細(xì)胞處理方式及處理時間等;

2)細(xì)胞培養(yǎng);

3)克隆形成實(shí)驗(yàn);

4)克隆形成實(shí)驗(yàn)圖片及實(shí)驗(yàn)報告,。

我們擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室,、精良的實(shí)驗(yàn)設(shè)備和經(jīng)驗(yàn)豐富的科研技術(shù)人員。技術(shù)團(tuán)隊(duì)包括研究員(博士后)2人,,助理研究員(博士)4人,,核心研究員(碩士)15人,主要致力于基因組學(xué),、轉(zhuǎn)錄組學(xué),、蛋白質(zhì)組學(xué)、代謝組學(xué),、生物化學(xué),、病理檢測、基因檢測等技術(shù)在科研中的應(yīng)用與推廣,。通過高度細(xì)分,、較好的的服務(wù)平臺,為廣大客戶提供了完善的技術(shù)解決方案和服務(wù),。目前,,及,涉及臨床醫(yī)學(xué),、腫瘤生物學(xué),、免疫學(xué)、細(xì)胞生物學(xué),、分子生物學(xué)等生命科學(xué),、醫(yī)學(xué)等諸多領(lǐng)域。


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