一,、RNA的提取

二,、DNase|消化樣品RNA 中的DNA

三、RNA瓊脂糖凝膠電泳

四,、RNA反轉(zhuǎn)錄為cDNA

Real-Time PCR引物設(shè)計(jì)的要求

1Tm=55~65℃

2 GC=30~80%

3 PCR擴(kuò)增產(chǎn)物長(zhǎng)度:引物的產(chǎn)物大小不要太大,，一般在80~300 bp之間都可。

4 引物的退火溫度要高,，一般要在60 ℃以上,。

五、cDNA與引物質(zhì)量檢測(cè)

選擇特異性好,，擴(kuò)增效率高的引物作為實(shí)時(shí)熒光使用引物,。

六、利用相對(duì)定量的方法分析目的基因表達(dá)量的情況:

常用的看家基因有B-actin,，GAPDH,，18S rRNA

七、定量PCR檢測(cè)

八,、擴(kuò)增曲線和溶解曲線

溶解曲線全部為單峰表明為特異性擴(kuò)增,，熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個(gè)階段;熒光背暑信號(hào)階段,，熒光信號(hào)指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺(tái)期。

我們擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室,、精良的實(shí)驗(yàn)設(shè)備和經(jīng)驗(yàn)豐富的科研技術(shù)人員,。技術(shù)團(tuán)隊(duì)包括研究員（博士后）2人，助理研究員（博士）4人,，核心研究員（碩士）15人,，主要致力于基因組學(xué)、轉(zhuǎn)錄組學(xué),、蛋白質(zhì)組學(xué),、代謝組學(xué)、生物化學(xué),、病理檢測(cè),、基因檢測(cè)等技術(shù)在科研中的應(yīng)用與推廣。通過(guò)高度細(xì)分,、較好的的服務(wù)平臺(tái),，為廣大客戶提供了完善的技術(shù)解決方案和服務(wù)。目前,，及,，涉及臨床醫(yī)學(xué)、腫瘤生物學(xué),、免疫學(xué),、細(xì)胞生物學(xué),、分子生物學(xué)等生命科學(xué),、醫(yī)學(xué)等諸多領(lǐng)域。