詳細信息：

1.  表面標記或生物合成標記的細胞在裂解緩沖液中于4℃放置1 h 后,，再于4℃3 000 g 離心10 min 除去細胞核,，然后將所得上清在10000 g 離心1 min。

 2.  一次性對上清進行預處理,，每200 μl 上清加入10 μl 活化后被淬滅的瓊脂糖對照,。在旋轉揺床中室溫揺蕩2 h 或在4℃過夜,。200 g 離心1 min，保留上清,。

 3.  在1.5 ml 的微量離心管中加滿裂解液室溫作用10 min,，對其進行預包被。吸去液體后,，加入105~106 cpm 的含抗原的放射性標記上清,，加稀釋緩沖液使終體積為200 μl。 

4.  加入10 μl 1：1的抗體-Sepharose偶聯(lián)物膠漿/稀釋緩沖液,。4℃在旋轉搖床中搖蕩1. 5~3 h,，一直保持Sepharose呈混懸狀。

5.  Sepharose偶聯(lián)物依次用1 ml 下面列出的緩沖液洗滌,。毎次洗完后,，200 g 離心5 min 或微量離心5 s。以細頭的巴斯德吸管小心吸去上清,，僅在沉淀的上面留10 μl 的液體,。在第4次洗滌后，離心甩下管壁所有殘余液滴并將其吸去,，沉淀上僅留下約 10 μl,。

6.   加入20~50 μl SDS樣品緩沖液。由于樣品緩沖液比重大于洗滌緩沖液,，它可滲透到Sepharose中,，不要用旋渦混合器旋起SEpharose，以免使之粘附在緩沖液液面以上的管壁,。蓋緊蓋子,，于100℃保溫5 min。

7.  用旋渦混合器混勻,，200 g 離心或微量離心5 s。將上清加樣于凝膠以SDS-PAGE分析,，使用增感屏進行放射自顯影或熒光自顯影或檢測標記蛋白質,。

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