實(shí)驗(yàn)流程?

1. ?樣本前處理?

• ?固定?：組織需用10%中性福爾馬林或4%多聚甲醛固定24小時(shí)以上
  ,。

• ?脫水包埋?：常規(guī)梯度酒精脫水,、透明后石蠟包埋,，切片厚度建議5μm
  ,。

2. ?脫蠟至水?

• 依次浸泡：二甲苯Ⅰ 20min → 二甲苯Ⅱ 20min → 無(wú)水乙醇Ⅰ 5min → 無(wú)水乙醇Ⅱ 5min → 75%酒精5min → 蒸餾水沖洗3遍
  。

3. ?普魯士藍(lán)染色?

• ?染液配制?：等體積混合2%K?[Fe(CN)?與2%鹽酸溶液
  ,。

• ?染色時(shí)間?：切片浸入染液30分鐘至1小時(shí)（根據(jù)組織類型調(diào)整）
  ,。

• ?沖洗?：蒸餾水洗2遍終止反應(yīng)
  。

4. ?復(fù)染與封片?

• ?核固紅復(fù)染?：1-5分鐘染細(xì)胞核,，流水沖洗
  ,。

• ?脫水透明?：無(wú)水乙醇脫水（兩缸各5分鐘）→ 二甲苯透明（兩缸各5分鐘）→ 中性樹(shù)膠封片。

?染色結(jié)果?

• ?陽(yáng)性信號(hào)?：三價(jià)鐵沉積呈藍(lán)色顆粒（如含鐵血黃素）
  ,。

• ?細(xì)胞核?：核固紅復(fù)染后呈紅色
  ,。

?關(guān)鍵注意事項(xiàng)?

• ?染液新鮮度?：K?[Fe(CN)?與鹽酸需現(xiàn)配現(xiàn)用，避免失效
  ,。

• ?分化控制?：顯微鏡下觀察藍(lán)色信號(hào)，避免過(guò)度沖洗導(dǎo)致脫色
  ,。

• ?封片技巧?：二甲苯未干時(shí)快速封片，防止高倍鏡下出現(xiàn)結(jié)晶偽影6,。

?應(yīng)用示例?

• ?病理診斷?：檢測(cè)肝臟,、骨髓中的鐵代謝異常
  。

• ?外包服務(wù)?：可聯(lián)系伊萊博生物科技等專業(yè)機(jī)構(gòu)

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