實驗流程?

1. ?樣本準備?

• 新鮮組織速凍：-25℃冷凍箱速凍3-5分鐘,，切8μm厚度切片
  。

• 直接固定：切片經(jīng)4%多聚甲醛或95%乙醇固定10分鐘，蒸餾水沖洗
  ,。

2. ?染色步驟?

• ?焦油紫/硫堇染色?：浸入1%焦油紫或硫堇染液10分鐘至1小時（根據(jù)組織類型調(diào)整）
  。

• ?分色?：70%酒精分化數(shù)秒至數(shù)分鐘,，顯微鏡下控制至背景透明,、Nissl小體清晰
  。

3. ?脫水封片?

• 梯度酒精脫水（70%→80%→95%→無水乙醇）,，二甲苯透明,，中性樹膠封固
  。

?關鍵注意事項?

• ?染色控制?：分色是核心步驟,，需顯微鏡下實時觀察避免過度脫色
  ,。

• ?結果判讀?：

• ?陽性信號?：Nissl小體呈深紫色（神經(jīng)元胞質(zhì)內(nèi)顆粒狀結構）。

• ?背景?：應為無色或淺灰色,，否則需延長分色時間
  ,。

?與石蠟切片對比?

• ?優(yōu)勢?：冰凍切片保留更多脂溶性成分，適合快速檢測
  ,。

• ?局限性?：組織形態(tài)略腫脹,，需經(jīng)驗判讀
  ,。

如需長期保存，建議轉(zhuǎn)換為石蠟切片（需避免解凍后固定）