大鼠超排可以用于研究環(huán)境污染物或藥物對(duì)生殖系統(tǒng)的毒性影響,；通過(guò)誘導(dǎo)超排并觀察卵母細(xì)胞和胚胎的發(fā)育情況,，可以評(píng)估潛在的生殖毒性,。大鼠卵母細(xì)胞的發(fā)育過(guò)程可以分為3個(gè)階段：GV期,、MI期,、MⅡ期,。
方法
1.雌性SD大鼠,，腹腔注射PMSG 60IU，注射PMSG 46-48h后,，腹腔注射hCG 20IU,，誘導(dǎo)超排。
2.準(zhǔn)備卵母細(xì)胞培養(yǎng)滴：在60mm培養(yǎng)皿內(nèi)做若干水滴狀的滴,，并用礦物油覆蓋,，放入培養(yǎng)箱(37 ℃、5%CO2)平衡4h以上(推薦過(guò)夜平衡),。
3.卵母細(xì)胞采集的時(shí)間通常在SD大鼠注射hCG后13-16h內(nèi)進(jìn)行,。
4.雌性SD大鼠背部、腹側(cè)備皮,，酒精消毒背側(cè),、腹側(cè)皮膚。在距離大鼠脊柱1cm,、肋下1cm的交叉位置剪開(kāi)皮膚,、肌肉，可見(jiàn)白色的脂肪組織,，拉出脂肪組織,，可見(jiàn)到粉紅色的卵巢，摘除卵巢及輸卵管,，將其放入500μL的KSOM胚胎培養(yǎng)液液體中,。
5.在體式顯微鏡下觀察到輸卵管的上部(壺腹部)有一個(gè)明顯的膨大處。用鑷子固定輸卵管,，用一根1 ml注射器縱向撕開(kāi)壺腹部,，用此法將其整個(gè)撕裂，卵團(tuán)會(huì)游離到KSOM胚胎培養(yǎng)液液體中,。
6.在KSOM胚胎培養(yǎng)液中再加入同體積的透明質(zhì)酸酶溶液(0.6mg/mL),，用移液槍輕輕吹打幾下，放入CO2培養(yǎng)箱中,，1分鐘后取出,。
7.在顯微鏡下用移卵管收集卵母細(xì)胞到卵母細(xì)胞培養(yǎng)滴中，并用剩下的液滴逐步清洗，清洗結(jié)束后放回37℃ CO2培養(yǎng)箱中,。
8. GV期,、MI期、MⅡ期的卵母細(xì)胞,。
GV期：這是卵母細(xì)胞生長(zhǎng)和發(fā)育的早期階段,，卵母細(xì)胞處于減數(shù)分裂的第一次分裂前期。
MI期：卵母細(xì)胞進(jìn)入減數(shù)分裂的第一次中期,。
MⅡ期：這是卵母細(xì)胞成熟的最終階段,，卵母細(xì)胞準(zhǔn)備好受精
注意事項(xiàng)：
大鼠的輸卵管不直接與卵巢相連，而是緊貼卵巢表面,，呈彎彎曲曲的形狀,。大鼠輸卵管可分為漏斗部、壺腹部,、峽部和子宮部,。
