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中級(jí)會(huì)員 | 第6年

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小鼠脾臟單細(xì)胞懸液的制備方法

時(shí)間:2024/6/14閱讀:892
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1. 8周齡C57BL/6小鼠摘眼球放血,。

2. 75%的酒精中,,浸泡5min

3. 無菌狀態(tài)下取脾臟,。

4. 取一干凈10cm大皿,,放入無菌的70um濾網(wǎng),將脾臟置于濾網(wǎng)上,,加入2ml培養(yǎng)基,。

5. 用研磨棒輕輕研磨臟器,將脾臟組織研磨成單細(xì)胞狀態(tài),,直到只剩下臟器的結(jié)締組織為止,。

6. 研磨時(shí)動(dòng)作應(yīng)輕柔,用力過大可導(dǎo)致細(xì)胞死亡,。

7. 棄去濾網(wǎng)和濾網(wǎng)上的結(jié)締組織,,收集平皿內(nèi)的細(xì)胞懸液,400g4min離心沉淀,。

8. PBS重懸沉淀,,就可以進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。


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