一、操作步驟
1.組織 4℃ 條件下從醫(yī)院取回,。
2.消毒取樣的 15ml 管,，取出組織，放到 10ml 大皿中,。
3.用含 4 抗的 PBS 溶液浸泡,，清洗組織,。
4.再用組織緩沖液浸泡、清洗三遍,。
5.將組織剪成 1mm3 大小的組織塊,，轉移到 15ml 管中消化。
6.在 37℃ 水浴鍋中,，消化 15min,。
7.取少量液體在顯微鏡下觀察，看到較多的單細胞和較少的細胞簇后,，終止消化,。
8.用 100μm 篩過濾，然后 300g4℃ 離心 5min,，移去上清,。
9.重懸沉淀,，轉移到 2ml 離心管中,，300g4℃ 離心 5min，移去上清,。
10.估算沉淀的細胞量,，以 1:25 的比例添加基質膠，重懸,。
11.24 孔板鋪板,，冰上操作，每孔點膠 25ul,。
12.鋪板后,，放到 37℃ 細胞培養(yǎng)箱中 15min 成膠。
13.然后每孔添加 600ul 結直腸癌類器官培養(yǎng)基,，放到 37℃ 細胞培養(yǎng)箱中,。
二、結果展示
