一、背景
      海馬是大腦顳葉內側的一個解剖結構,，因為形狀類似海馬稱為海馬體,。海馬體的主要組成基本單位是神經元，海馬神經元的生理功能與人的記憶密切相關。一些疾病會使海馬神經元出現(xiàn)損傷,，比如常見的阿爾茲海默病,、單純皰疹病毒性腦炎、自身免疫性腦炎等等,，如果這些疾病出現(xiàn),，就會導致記憶障礙，甚至癡呆的表現(xiàn),。
      神經細胞是近代神經學科中研究重點之一,，神經細胞體外培養(yǎng)是指在體外模擬建立體內生長條件，使神經細胞或神經膠質細胞在其生存和生長并維持其形態(tài)和功能的方法,。神經細胞體外培養(yǎng)技術已成為當今神經科學研究中的主要方法之一,，與各種先進的技術結合在一起滲透到各個學科，但因神經細胞對體外培養(yǎng)條件要求條件較高難度大而又制約它的發(fā)展,。

二,、實驗步驟
1.無菌條件下，從懷孕18天的SD大鼠腹中取出胎鼠,，放在預冷的無鈣,、鎂的HBSS平衡鹽溶液中；                          
2.解剖顯微鏡下,，看清海馬結構,，剝去海馬上面的腦膜和血管；
3.加入0.05%胰酶-EDTA 消化液后放入 37℃孵箱內消化15分鐘,，每5分鐘搖晃一次,；
4.HBSS溶液洗三次；
5.在HBSS溶液中吹打10次左右,，吹打過程中不能有氣泡,；
6.所收集的上清過濾后，將細胞懸液于4℃1000rpm離心10min ,，棄上清,，管內加入種植液1重懸；
7.臺盼藍染色計數(shù),，以 3 x 104cells/孔種入包被的24孔板,，37℃，5%CO2,，95%飽和濕度的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),。4-6小時后，全量換種植液2,；
8.每周換液兩次,，每次半量換液,。

                                          1d                                                                                    7d