一、流動(dòng)相的pH應(yīng)在使用范圍內(nèi)
以硅膠為基質(zhì)的反相色譜柱的pH范圍為2~9,，流動(dòng)相超過(guò)其pH范圍將會(huì)導(dǎo)致硅膠基質(zhì)流失和鍵合相碳鏈斷裂,，使柱效下降，壽命變短,。
二,、去除樣品和流動(dòng)相匯總的固體顆粒樣品和流動(dòng)相中含有固體顆粒物質(zhì)會(huì)堵塞色譜柱篩板，不僅會(huì)引起柱壓的升高,，而且也會(huì)引起柱效下降,。因此，建議使用超純水和色譜純?cè)噭?，在分析前?duì)樣品進(jìn)行針筒過(guò)濾,，流動(dòng)相過(guò)0.45um濾膜。
三,、使用保護(hù)柱或在線過(guò)濾器保護(hù)柱和在線過(guò)濾器上都有篩板,，其孔徑與色譜柱篩板孔徑相同，因此可以阻止固體顆粒物質(zhì)到達(dá)色譜柱，有效防止色譜柱篩板的堵塞,。由于柱壓升高在分析故障中占很大比例,，因此除對(duì)樣品和流動(dòng)相進(jìn)行過(guò)濾外，建議您在色譜柱進(jìn)樣端加上保護(hù)柱或在線過(guò)濾器,。
四,、正確使用緩沖鹽緩沖鹽使用不當(dāng)會(huì)使其在流動(dòng)相(含有機(jī)溶劑)中析出，堵塞填料基質(zhì)上的微孔和顆粒間的空隙,，使填料板結(jié),，柱壓上升；同時(shí)阻礙了基質(zhì)上的鍵合的碳鏈自由舒展,，使用色譜柱的保留能力下降，柱效降低,。
建議使用前要過(guò)濾,，使用后要沖洗。具體方法如下：1,、等度條件：使用緩沖鹽前和使用后需要過(guò)濾流動(dòng)相1.0ml/min流速?zèng)_洗60min.
2,、梯度條件：用含有緩沖鹽的流動(dòng)相跑梯度之前，用與初始流動(dòng)相組成相同的過(guò)濾流動(dòng)相似1.0ml/min流速?zèng)_洗60min,；分析完成后,，再用該過(guò)濾流動(dòng)以1.0ml/min沖洗色譜柱120min。含緩沖鹽流動(dòng)相的梯度設(shè)定應(yīng)盡量平緩,，以避免梯度過(guò)程中緩沖鹽析出,。
五、柱清洗方法：1,、未使用緩沖鹽：每天分析完成后,，用純甲醇或純乙腈反向沖洗色譜柱60min。
2,、使用過(guò)緩沖鹽：分析完成后,，先后用上述方法除去緩沖鹽，然后再用純甲醇或乙腈反向沖洗色譜柱60min,。
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