工作原理
分子的紫外可見吸收光譜是由于分子中的某些基團(tuán)吸收了紫外可見輻射光后，發(fā)生了電子能級(jí)躍遷而產(chǎn)生的吸收光譜,。由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子,、原子和不同的分子空間結(jié)構(gòu)，其吸收光能量的情況也就不會(huì)相同,，因此,，每種物質(zhì)就有其*的、固定的吸收光譜曲線,，可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長(zhǎng)處的吸光度的高低判別或測(cè)定該物質(zhì)的含量,，這就是分光光度定性和定量分析的基礎(chǔ)。
分光光度分析就是根據(jù)物質(zhì)的吸收光譜研究物質(zhì)的成分,、結(jié)構(gòu)和物質(zhì)間相互作用的有效手段,。它是帶狀光譜，反映了分子中某些基團(tuán)的信息,?？梢杂脴?biāo)準(zhǔn)光圖譜再結(jié)合其它手段進(jìn)行定性分析,。
根據(jù)Lambert-Beer定律說(shuō)明光的吸收與吸收層厚度成正比，比耳定律說(shuō)明光的吸收與溶液濃度成正比,；如果同時(shí)考慮吸收層厚度和溶液濃度對(duì)光吸收率的影響,，即得朗伯-比耳定律。即A=εbc,，(A為吸光度,，ε為摩爾吸光系數(shù)，b為液池厚度,，c為溶液濃度)就可以對(duì)溶液進(jìn)行定量分析,。
將分析樣品和標(biāo)準(zhǔn)樣品以相同濃度配制在同一溶劑中，在同一條件下分別測(cè)定紫外可見吸收光譜,。若兩者是同一物質(zhì),，則兩者的光譜圖應(yīng)一致。如果沒有標(biāo)樣,，也可以和現(xiàn)成的標(biāo)準(zhǔn)譜圖對(duì)照進(jìn)行比較,。這種方法要求儀器準(zhǔn)確，精密度高,，且測(cè)定條件要相同,。
實(shí)驗(yàn)證明，不同的極性溶劑產(chǎn)生氫鍵的強(qiáng)度也不同,，這可以利用紫外光譜來(lái)判斷化合物在不同溶劑中氫鍵強(qiáng)度，以確定選擇哪一種溶劑,。
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