首頁 >> 供求商機(jī)
貨物所在地:上海上海市
更新時(shí)間:2024-10-26 21:00:07
瀏覽次數(shù):201
在線詢價(jià)收藏產(chǎn)品( 聯(lián)系我們,,請(qǐng)說明是在 化工儀器網(wǎng) 上看到的信息,,謝謝?。?/p>
細(xì)胞電轉(zhuǎn)染(電轉(zhuǎn)),,也叫細(xì)胞電穿孔(electroporation), 是把外源大分子物質(zhì)DNA、 RNA,、 siRNA,、 蛋白質(zhì)以及一些小分子等導(dǎo)入細(xì)胞膜內(nèi)部的重要方法。
在瞬間強(qiáng)大電場(chǎng)的作用下,,溶液中細(xì)胞的細(xì)胞膜具有了一定的通透性,,帶電的外源物質(zhì)以類似電泳的方式進(jìn)入細(xì)胞膜。 由于細(xì)胞膜磷脂雙分子層的電阻很大,,細(xì)胞外部電流場(chǎng)產(chǎn)生的細(xì)胞兩極電壓都被細(xì)胞膜承受,,細(xì)胞質(zhì)內(nèi)分到的電壓可以忽略不計(jì),細(xì)胞質(zhì)內(nèi)部幾乎沒有電流,,因此也決定了正常范圍內(nèi)的電轉(zhuǎn)過程中細(xì)胞毒性很小,。 電場(chǎng)使DNA等物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞膜后只能停止在細(xì)胞膜附近,隨后細(xì)胞本身的機(jī)制可以允許這些物質(zhì)到細(xì)胞核等處,。
普通電轉(zhuǎn)能量過高可導(dǎo)致部分細(xì)胞因膜破壞而死亡,,其中能存活下來的細(xì)胞內(nèi)部都不會(huì)受到電流影響,因?yàn)榧?xì)胞膜完整是細(xì)胞存活的必要條件,。
由千電轉(zhuǎn)技術(shù)依靠的是物理方法,,細(xì)胞表面的分子特性對(duì)電轉(zhuǎn)影響比較小。 相比化學(xué)轉(zhuǎn)染方法和病毒載體轉(zhuǎn)染方法,,電轉(zhuǎn)可以用在所有的細(xì) 胞種類上,,而且容易定量控制。
Celetrix™ 電轉(zhuǎn)儀以及相關(guān)的電擊管與電轉(zhuǎn)液綜合優(yōu)化了儀器電學(xué)特性,、 電擊管內(nèi)的電場(chǎng)均勻度以及電轉(zhuǎn)液的細(xì)胞保護(hù)作用,,是獲得高效、 低毒性細(xì)胞電轉(zhuǎn)的解決方案,。
應(yīng)用:
• 有效的細(xì)胞:幾乎所有的真核細(xì)胞,,包括所有細(xì)胞系,原代細(xì)胞,干細(xì)胞,,血液和免疫類細(xì)胞,,神經(jīng)細(xì)胞,植物細(xì)胞和胚胎,。
• 可以電轉(zhuǎn)的物質(zhì)包括DNA,、 RNA、 siRNA,、 蛋白質(zhì)等,。
• 適用實(shí)驗(yàn):瞬時(shí)或穩(wěn)定表達(dá)蛋白質(zhì)、 基因敲除與敲入,、 siRNA和其他分子機(jī)制研究。
• 科研領(lǐng)域:細(xì)胞分子生物學(xué),、 免疫學(xué),、 血液學(xué)、 神經(jīng)學(xué),、 癌癥研究,、 新藥開發(fā)等。
功能強(qiáng)大 操作簡(jiǎn)單
效率高 細(xì)胞死亡率低
適用所有真核細(xì)胞,;可以電轉(zhuǎn)DNA,、RNA、siRNA,、蛋白質(zhì)等,;
外觀美觀、界面簡(jiǎn)潔,、操作簡(jiǎn)單,。
電脈沖參數(shù)設(shè)定方便,內(nèi)部電路反應(yīng)迅速,,設(shè)定完成即可啟動(dòng),,瞬間完成電轉(zhuǎn)。
示波器功能,,顯示實(shí)際通過樣品的電流波形,,可視化掌控實(shí)驗(yàn)質(zhì)量。
LED照明燈,,清楚指示電擊管連接狀態(tài),。
功率強(qiáng)大,單次高效電轉(zhuǎn)可達(dá)1000ul,,可以經(jīng)濟(jì)快速的電轉(zhuǎn)大量細(xì)胞,。
全部過程只需5步
1、懸浮細(xì)胞(貼壁細(xì)胞先消化成單細(xì)胞狀態(tài))1000rpm離心3min。
2,、無血清細(xì)胞培養(yǎng)液洗一遍,、1000rpm離心1min。
3,、重懸細(xì)胞在電轉(zhuǎn)液中,,加入DNA,將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至電擊管蓋好并放入儀器中,。
4,、設(shè)定參數(shù)進(jìn)行電擊,大部分細(xì)胞系可以使用30ms單脈沖,,只需改變一個(gè)電壓參數(shù),。
5、取出細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),。
技術(shù)參數(shù)
?儀器型號(hào) | LE款 | EX款 | |
體積使用范圍 | 20ul~200ul | 20ul~1000ul | |
常用細(xì)胞量 | 20ul | 0.2×106~2×106 | 0.2×106~2×106 |
120ul | 1.2×106~1.2×107 | 1.2×106~1.2×107 | |
200ul | 2×106~2×107 | 2×106~2×107 | |
600ul | 6×106~6×107 | ||
1000ul | 1×107~1×108 | ||
電轉(zhuǎn)脈沖電壓 | 300V-1500V | 300V-1500V |
應(yīng)用的優(yōu)勢(shì):
Celetrix新一代電轉(zhuǎn)可以高效轉(zhuǎn)染從新鮮PBMC到刺激培養(yǎng)階段的T細(xì)胞,。 與其他電轉(zhuǎn)技術(shù)相比, Celetrix電轉(zhuǎn)技術(shù)具有效率,。
我們的技術(shù)也具有細(xì)胞存活率,,并且細(xì)胞在電轉(zhuǎn)后能夠和未電轉(zhuǎn)細(xì)胞
Celetrix電轉(zhuǎn)儀使得CAR-T, TCR-T制備、 CRISPR介導(dǎo)的基因編輯等變得容易,。
目前70%以上的治療性抗體蛋白都是由CHO細(xì)胞產(chǎn)生
的,,Celetrix電轉(zhuǎn)技術(shù)對(duì)CHO細(xì)胞可以達(dá)到高效穩(wěn)定
(90%以上)的電轉(zhuǎn)效率和80%以上的存活率, 為治療 性抗體細(xì)胞轉(zhuǎn)染領(lǐng)域提供了更加高效,、便捷,、 穩(wěn)定的轉(zhuǎn) 染方法。
利用Celetrix的電轉(zhuǎn)技術(shù)電轉(zhuǎn)Cas9蛋白和gRNA (+)或者Cas9蛋白,,通過T7El核酸內(nèi)切酶檢測(cè)基因編輯效率,,在APP, AAVSl, OCT4和PDCDl四個(gè)基因位點(diǎn)的編輯效率均超過50%, 其中AAVSl基因位點(diǎn)編輯效率能夠達(dá)到70%。
• 電極杯中樣品與電極接觸面積大,,電化學(xué)反應(yīng)產(chǎn)生毒性物質(zhì)多,,并且產(chǎn)生非常多的氣泡。 氣泡對(duì)電轉(zhuǎn)的實(shí)際影響非常大,。
• 由千氣泡是絕緣體,,電流只能從氣泡之間的間隙溶液流過,這樣導(dǎo)致氣泡間隙的溶液中電流富集升高,,處千其中的細(xì)胞因承受太高的電壓而死亡,。
電極杯內(nèi)的溶液上方受到液面效應(yīng)影響,電場(chǎng)不均勻,。 靠近兩個(gè)電極1-2mm的區(qū)域由千氣泡的作用,,電場(chǎng)也不均勻,。電極杯內(nèi)電場(chǎng)比較均勻的較優(yōu)電轉(zhuǎn)區(qū)域很小(右圖藍(lán)色部分),,而1mm或者
2mm的電極杯甚至可能沒有較優(yōu)電轉(zhuǎn) 區(qū)域,。
液體樣品密封呈規(guī)整圓柱形,沒有液面效應(yīng)影響電場(chǎng)均勻度,。
電極與液體接觸面積小,,氣泡少又而且被壓縮,不影響電流分配,。
電擊管內(nèi)部電場(chǎng)均勻,,全部都是有效電轉(zhuǎn) 區(qū)域。
(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)