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淺談流式細(xì)胞計(jì)數(shù)儀驗(yàn)證和校準(zhǔn)怎么做,？

流式細(xì)胞儀在生物藥廠里面,，不論計(jì)量校準(zhǔn)還是驗(yàn)證，都是科研和QC工作者頭疼的問(wèn)題,；

問(wèn)題1：買(mǎi)了很多年了,，驗(yàn)證會(huì)不會(huì)通不過(guò)，計(jì)量會(huì)不會(huì)通不過(guò)

問(wèn)題2：做一次計(jì)量動(dòng)輒5200以上的成本,。

問(wèn)題3：驗(yàn)證很多第三方不會(huì)做,，廠家做一次太貴了,。

那怎么解決這些流式細(xì)胞儀驗(yàn)證和校準(zhǔn)問(wèn)題呢？

流式細(xì)胞儀的測(cè)量原理：流式細(xì)胞計(jì)可同時(shí)進(jìn)行多參數(shù)測(cè)量,，信息主要來(lái)自特異性熒光信號(hào)及非熒光散射信號(hào),。測(cè)量是在測(cè)量區(qū)進(jìn)行的，所謂測(cè)量區(qū)就是照射激光束和噴出噴孔的液流束垂直相交點(diǎn),。液流中央的單個(gè)細(xì)胞通過(guò)測(cè)量區(qū)時(shí),，受到激光照射,這些生物學(xué)參數(shù)又和細(xì)胞對(duì)光線的反射、折射等光學(xué)特性有關(guān),。未遭受任何損壞的細(xì)胞對(duì)光線都具有特征性的散射,，因此可利用不同的散射光信號(hào)對(duì)不經(jīng)染色活細(xì)胞進(jìn)行分析和分選。經(jīng)過(guò)固定的和染色處理的細(xì)胞由于光學(xué)性質(zhì)的改變,，其散射光信號(hào)當(dāng)然不同于活細(xì)胞,。

一、那么流式細(xì)胞儀計(jì)量校準(zhǔn)包括哪些內(nèi)容呢,？

1,、    分辨力

2、    線性相關(guān)系數(shù)

3,、    檢出限

4,、    漂移

5、    重復(fù)性

6,、    示值誤差

二,、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)準(zhǔn)備

1、熒光微球,，單一熒光強(qiáng)度

2,、多重?zé)晒鈴?qiáng)度混合熒光微球標(biāo)準(zhǔn)品

3、計(jì)數(shù)熒光微球

4,、淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

校準(zhǔn)時(shí)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)不確定度不超過(guò)20%（K=2）

注：流式細(xì)胞儀復(fù)校間隔建議一般不超過(guò)1年,；

三、流式細(xì)胞儀驗(yàn)證

驗(yàn)證一般在藥廠都是源自自己的工藝,，校準(zhǔn)也是驗(yàn)證的一部分,，下面來(lái)看，其實(shí)驗(yàn)證和校準(zhǔn)有很多重合的地方,。流式細(xì)胞儀的性能評(píng)估,，是評(píng)定儀器能否勝任高復(fù)雜性流式應(yīng)用的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)。根據(jù)流式細(xì)胞儀的性能評(píng)估標(biāo)準(zhǔn),，對(duì)流式細(xì)胞儀的以下指標(biāo)進(jìn)行了評(píng)估：

1,、檢測(cè)靈敏度；

2,、動(dòng)態(tài)范圍,；

3,、群體分辨能力；

4,、線性度,；

5、穩(wěn)定性,；

6,、可重復(fù)性；

7,、對(duì)微顆粒的檢測(cè)能力,；

下面來(lái)看部分檢測(cè)結(jié)果：

每日質(zhì)控微球rCV統(tǒng)計(jì)

八峰彩虹微球在流式細(xì)胞儀上的檢測(cè)結(jié)果

對(duì)不同大小的微球檢測(cè)結(jié)果

以上就是我們關(guān)于流式細(xì)胞儀驗(yàn)證大概的所做的內(nèi)容，去測(cè)試流式細(xì)胞儀的穩(wěn)定性,、重復(fù)性,、靈敏度高,，從而去驗(yàn)證儀器的性能,。

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如下是在校準(zhǔn)結(jié)果報(bào)告中體現(xiàn)的表格，供用戶(hù)去參考,。

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