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IncuCyte S3：第三代長時(shí)間動(dòng)態(tài)活細(xì)胞成像及數(shù)據(jù)分析系統(tǒng)
目前,，大部分的細(xì)胞檢測方法采用的仍然是傳統(tǒng)的終點(diǎn)法——僅僅給出終結(jié)果，而且往往需要標(biāo)記細(xì)胞和破壞細(xì)胞,。這種方法無法得到細(xì)胞在生長時(shí)的真正狀態(tài),，也無法對(duì)細(xì)胞的生長過程做出動(dòng)態(tài)的監(jiān)測和分析。美國Essen公司開發(fā)了第三代長時(shí)間實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)活細(xì)胞成像分析儀——IncuCyte S3,，活細(xì)胞動(dòng)態(tài)成像分析系統(tǒng)用一種非侵入式的方法,，記錄細(xì)胞的實(shí)時(shí)生長狀態(tài)。這種成像方法,，被稱為“實(shí)時(shí)細(xì)胞內(nèi)涵成像”（Live Content Imaging）,，擴(kuò)充了用戶記錄和理解細(xì)胞生長,、細(xì)胞行為和細(xì)胞形態(tài)的途徑。
活細(xì)胞動(dòng)態(tài)成像分析系統(tǒng)（IncuCyte）是一套用于非傷害的,、長時(shí)間實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)的活細(xì)胞成像分析平臺(tái),。IncuCyte S3通過將成像系統(tǒng)放置于培養(yǎng)箱中，實(shí)時(shí)記錄分析細(xì)胞生長變化,，實(shí)現(xiàn)多組細(xì)胞數(shù)天或數(shù)十天細(xì)胞生長發(fā)育,、運(yùn)動(dòng)、蛋白表達(dá)等指標(biāo)的長期監(jiān)測,，擴(kuò)充了用戶記錄和研究細(xì)胞生長,、細(xì)胞行為和細(xì)胞形態(tài)的途徑。
1.置于培養(yǎng)箱內(nèi),，長時(shí)成像,、無需值守
IncuCyte S3安裝在培養(yǎng)箱中，長時(shí)間記錄每一個(gè)時(shí)間節(jié)點(diǎn),，時(shí)間可長達(dá)7天至30天,。輸出每孔*實(shí)驗(yàn)影像，幫助用戶了解每個(gè)孔內(nèi)連續(xù)變化的動(dòng)態(tài)數(shù)據(jù),，并自動(dòng)統(tǒng)計(jì)分析多樣化的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,。
2.多客戶端遠(yuǎn)程操控，獲取及分析圖像數(shù)據(jù)
基于客戶-服務(wù)器原理,，可在局域網(wǎng)上任何一臺(tái)計(jì)算機(jī)訪問IncuCyte,，進(jìn)行遠(yuǎn)程監(jiān)控、獲取和分析實(shí)驗(yàn)情況,。
3.高通量及兼容性
支持目前所有標(biāo)準(zhǔn)的細(xì)胞培養(yǎng)耗材,，兼容市面上200余種實(shí)驗(yàn)耗材，節(jié)省實(shí)驗(yàn)成本,，可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要自由組合孔板,、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)瓶,、載玻片等,。
4.直觀易用的軟件操作界面
S3系統(tǒng)9TB、18TB的存儲(chǔ)空間,，支持外部數(shù)據(jù)存儲(chǔ)系統(tǒng),，輸出向局域網(wǎng)內(nèi)任何電腦，圖像,、視頻等多種保存形式,。
5.業(yè)界認(rèn)可-超2500文獻(xiàn)發(fā)表
6.IncuCyte S3的應(yīng)用領(lǐng)域（>20種以上應(yīng)用）：
細(xì)胞遷移 細(xì)胞侵襲 細(xì)胞凋亡
細(xì)胞質(zhì)控 細(xì)胞毒性 細(xì)胞增殖
單克隆篩選 全孔成像 干細(xì)胞監(jiān)測
血管新生 神經(jīng)生長跟蹤 3D腫瘤球體觀察
報(bào)告基因 T細(xì)胞免疫殺傷 細(xì)胞趨化
細(xì)胞吞噬
應(yīng)用舉例：
（一） 監(jiān)測細(xì)胞毒性（Cytotoxicity）
發(fā)生細(xì)胞毒性時(shí)，細(xì)胞膜會(huì)破裂,，這時(shí)使用非滲透的染料,，如YOYO-1或CellTox Green就可以將發(fā)生細(xì)胞毒性的細(xì)胞染色,，然后用IncuCyte進(jìn)行觀察。
關(guān)鍵特性：
1）運(yùn)用NucLight慢病毒試劑標(biāo)記健康細(xì)胞,，用細(xì)胞非滲透性DNA染料標(biāo)記發(fā)生毒性細(xì)胞,，同時(shí)監(jiān)測細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性,；
2）可區(qū)別細(xì)胞毒性（Cytotoxic）和細(xì)胞抑制（Cytostatic）,；
3）可將數(shù)據(jù)導(dǎo)出到第三方軟件，計(jì)算EC50和IC50,；
4）可通過獲取4×,、10×或20×的高清晰度相差圖像，跟蹤細(xì)胞形態(tài),，確認(rèn)細(xì)胞是否死亡,；
5）過程免洗，混合染料,，然后讀數(shù)即可,；
6）可觀察多種化合物和藥物對(duì)細(xì)胞的毒性作用。
（二） 監(jiān)測報(bào)告基因（Reporter Gene）
細(xì)胞用含GFP/RFP的載體轉(zhuǎn)染,，GFP/RFP的上游插入需要研究的啟動(dòng)子,。這樣就可以通過IncuCyte觀察GFP/RFP的時(shí)序性表達(dá)的熒光強(qiáng)度和熒光細(xì)胞個(gè)數(shù)，從而監(jiān)測通路刺激（如NF-κB）的作用,、啟動(dòng)子的活性或報(bào)告基因的表達(dá)活性,。
與傳統(tǒng)的終點(diǎn)熒光素酶方法對(duì)比，IncuCyte的關(guān)鍵特征在于：
1）數(shù)據(jù)豐富：96-或384-孔的實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)數(shù)據(jù)可獲得終點(diǎn)法無法獲得的洞察能力,；
2）節(jié)約成本：無需裂解,，無需熒光素酶法需要的終端反應(yīng)底物，節(jié)省時(shí)間和花費(fèi),；
3）方便：實(shí)時(shí)動(dòng)態(tài)讀數(shù)使用戶能在單個(gè)的實(shí)驗(yàn)中優(yōu)化信號(hào)窗,，無需事先決定何時(shí)終止實(shí)驗(yàn)；
4）敏感：可得到每個(gè)條件下的多個(gè)時(shí)間點(diǎn)數(shù)據(jù),，增加了實(shí)驗(yàn)的定量性和穩(wěn)定性,；
5）可定制：用戶可根據(jù)需要定制啟動(dòng)子，修改反應(yīng)體系,，監(jiān)測藥物對(duì)報(bào)告基因的作用,。