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Cas9x3.0-CRISPR基因敲除試劑盒
  • Cas9x3.0-CRISPR基因敲除試劑盒

貨物所在地:江蘇蘇州市

地: 蘇州

更新時間:2025-02-19 09:13:11

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CRISPR基因敲除試劑盒(Cas9x3.0)包含2個Cas9X™算法優(yōu)化的 gRNA序列載體和特異的同源DNA片段,,DNA片段含有抗性和GFP 熒光,,并攜帶有一段特殊同源序列,不僅可為后續(xù)基因敲除細胞的篩選提供藥物抗性,,也可以通過流式篩選獲得,,包括了人(Human) 和小鼠(Mouse)的所有基因的敲除。

CRISPR基因敲除試劑盒


| 產(chǎn)品名稱:CRISPR基因敲除試劑盒

| 產(chǎn)品貨號:Cas9x3.0

| 產(chǎn)品介紹

CRISPR基因敲除試劑盒(Cas9x3.0)是海星生物在多年基因編輯服務的基礎上研發(fā)的高效快捷的基因敲除試劑盒,。包括了人(Human) 和小鼠(Mouse)的所有基因的敲除,。

Cas9x3.0試劑盒包含2個Cas9X™算法優(yōu)化的 gRNA序列載體和特異的同源DNA片段,DNA片段含有抗性和GFP 熒光,,并攜帶有一段特殊同源序列,,不僅可為后續(xù)基因敲除細胞的篩選提供藥物抗性,也可以通過流式篩選獲得敲除細胞,。

Cas9x3.0試劑盒對分裂細胞和非分裂細胞都有非常高的敲除效率,。

| 產(chǎn)品特點

敲除高效率——比病毒敲除方式更實惠、更穩(wěn)定,、更安全

實驗超簡單——操作流程簡單,,能養(yǎng)好細胞就能做基因敲除

| 產(chǎn)品構(gòu)成


產(chǎn)品構(gòu)成

| 產(chǎn)品原理

CRISPR基因敲除試劑盒 (Cas9x3.0)依據(jù)HDR和 NHEJ修復原理進行產(chǎn)品開發(fā)。

優(yōu)化的gRNA引導Cas9蛋白對特定位點進行切割,,產(chǎn)生DNA 雙鏈斷裂(Double-Strand Break, DSB),,并誘導同源線性化DNA片段(攜帶抗性基因和熒光基因)整合到該位點,再通過抗性藥物(puroR )或熒光(GFP)進行篩選,,從而獲得基因敲除的細胞和單克隆,。

CRISPR基因敲除試劑盒 (Cas9x3.0) 的敲除效率是傳統(tǒng)基因敲除策略的2~5倍。因為的除策略是通過在基因位導入 Donor DNA( puroR & GFP )從而達到敲除目的蛋白效果,,同時也可以在DSB位點導入序列移碼,,導致蛋白翻譯提前終止。這兩個原理的疊加,,可以輕松獲得“等位基因"純合敲除細胞株,。

<strong>CRISPR基因敲除試劑盒</strong>1

| 應用流程

CRISPR基因敲除試劑盒 (Cas9x3.0)操作步驟(脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法):

本試劑盒建議采用轉(zhuǎn)染試劑是Lipofectamine® 2000 Reagent (cat#11668-030),具體參照轉(zhuǎn)染試劑說明材料。不同類型的轉(zhuǎn)染試劑,,請按照制造商的操作說明進行轉(zhuǎn)染,。

注意:懸浮細胞不推薦使用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法。

CRISPR基因敲除試劑盒 (Cas9x3.0)操作步驟(電轉(zhuǎn)化法):

本試劑盒推薦Neon轉(zhuǎn)染系統(tǒng),,具體參照設備對每種細胞參數(shù),。不同類型的電轉(zhuǎn)設備,請按照制造商的操作說明進行優(yōu)化,。

注意:懸浮細胞推薦使用電轉(zhuǎn)化法,。


細胞轉(zhuǎn)染


CRISPR基因敲除試劑盒 (Cas9x3.0)配有eGFP對照DNA,可以按照實際使用的方法和細胞情況,,進行實驗摸索,,建議48小時后的目的細胞的eGFP的陽性率不低于50%, Cas9x3.0試劑盒才能獲得良好的敲除效果,。



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