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15立方環(huán)氧乙烷滅菌柜

概述

　　目前器械廣泛采用環(huán)氧乙烷來滅菌的 環(huán)氧乙烷是易燃易爆的有毒氣體,，分子式為C2H4O，具有芳香的醚味,，在4°C時(shí)候相對(duì)密度為0.884,，沸點(diǎn)為10.8°C,其密度為1.52g/cm3，在室溫條件下,，很容易揮發(fā)成氣體,，當(dāng)濃度過高時(shí)可引起爆炸。

　　優(yōu)點(diǎn)是：l 能殺滅所有微生物,，包括細(xì)菌芽孢,。 2 滅菌物品可以被包裹、整體封裝,，可保持使用前呈無菌狀態(tài),。 3 相對(duì)而言，EO不腐蝕塑料,、金屬和橡膠,不會(huì)使物品發(fā)生變黃變脆,。 4 能穿透形態(tài)不規(guī)則物品并滅菌。5 可用于那些不能用消毒劑浸泡,，干熱,、壓力、蒸汽及其他化學(xué)氣體滅菌之物品的滅菌,。

15立方環(huán)氧乙烷滅菌柜

目的

　　測(cè)定環(huán)氧乙烷滅菌器(下簡(jiǎn)稱滅菌器) 對(duì)細(xì)菌芽孢的殺滅能力,，以驗(yàn)證其滅菌性能是否符合原設(shè)計(jì)規(guī)定。

　　試驗(yàn)器材

　　(1) 枯草桿菌黑色變種( ATCC 9372 )芽孢菌片,。

　　含菌量要求為5 ×10cfu/片～5 × 10cfu/片(按活菌培養(yǎng)計(jì)數(shù)結(jié)果計(jì)),。在環(huán)氧乙烷量為600mg/L±30mg/L，溫度為54℃±2℃,，相對(duì)濕度為60%±10% 條件下,，菌片上芽孢存活時(shí)間應(yīng)≥7.8min，殺滅時(shí)間≤58min,，D值為2.6min～5.8min,。

　　(2) 染菌載體( 10mm × 10mm ，以布片為代表,，必要時(shí)可隨滅菌對(duì)象,，增用或改用其他載體。

　　(3) 聚乙烯塑料袋( 封裝菌片用,，大小為60mm× 40mm ,，厚0.2mm～0.4mm ),。

　　(4) 活菌培養(yǎng)計(jì)數(shù)所需器材(見2.1.1.3 )。

　　(5) 使用說明書中規(guī)定滅菌器可處理的物品(裝填滅菌器,，使達(dá)滿載要求),。

　　操作程序

　　(1) 根據(jù)試驗(yàn)要求，制備枯草桿菌黑色變種芽孢懸液和菌片,。菌片放入雙層聚乙烯塑料袋內(nèi)密封包裝,，每袋2片。每次試驗(yàn)用20袋,。

　　(2) 將滅菌器上,、中、下3層,，每層內(nèi)、中,、外各設(shè)一點(diǎn),，共設(shè)9點(diǎn)。每點(diǎn)物品中間布放1袋,，共需18袋試驗(yàn)菌片,。另將一袋（2片）菌片放置在室溫條件下作為陽性對(duì)照。

　　(3) 按使用說明書所規(guī)定的環(huán)氧乙烷濃度,、作用時(shí)間,、柜內(nèi)的溫度和相對(duì)濕度，在滿載條件下進(jìn)行環(huán)氧乙烷滅菌處理,。滿載用物品,，隨滅菌器用途而定。處理完畢,，取出菌片,，分別移種于5 ml 營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基中，置37℃ 培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),，7d后觀察終結(jié)果(定性培養(yǎng)檢測(cè)),。

　　對(duì)難以判斷結(jié)果的營養(yǎng)肉湯管，取其中0.2ml懸液接種營養(yǎng)瓊脂平板,，用無菌L棒涂抹均勻,，置37℃ 培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)。48h后涂片染色,，顯微鏡下觀察菌落形態(tài),，或進(jìn)一步做其他試驗(yàn)，判斷有無生長(zhǎng)或生長(zhǎng)的是否為試驗(yàn)菌,。若為非試驗(yàn)菌,，則應(yīng)重新進(jìn)行試驗(yàn),。

　　(4) 測(cè)試中，應(yīng)同時(shí)設(shè)立定性和定量陽性對(duì)照組與陰性對(duì)照組,。

　　(5) 定量陽性對(duì)照組,，以同批試驗(yàn)用菌片置室溫下，待消毒或滅菌試驗(yàn)組達(dá)規(guī)定作用時(shí)間后,，立即將該菌片2片分別放入含5.0mlPBS試管中,，各振敲打80次。取洗液按2.1.1.3 所示方法進(jìn)行活菌培養(yǎng)計(jì)數(shù),。

　　(6) 定性陽性對(duì)照組,，以同批試驗(yàn)用菌片置室溫下，待滅菌試驗(yàn)組達(dá)規(guī)定作用時(shí)間后,，立即將該菌片2 片,，分別接種于5.0ml 營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基，放入溫箱中作定性培養(yǎng),，觀察有細(xì)菌生長(zhǎng)情況,。

　　(7) 陰性對(duì)照組，以同批次試驗(yàn)用未染菌樣片2 片,，分別接種于5.0ml 營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基,，同時(shí)將未接種過的營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基放入培養(yǎng)箱中作定性培養(yǎng)，觀察有無細(xì)菌生長(zhǎng),。

　　(8) 試驗(yàn)重復(fù)5 次,。

　　(9)在5次試驗(yàn)中，每次試驗(yàn)中的陽性對(duì)照菌片,，回收菌量均應(yīng)在5×10cfu/片～5×10cfu/片,；定性陽性對(duì)照組，細(xì)菌生長(zhǎng)良好,；陰性對(duì)照應(yīng)無菌生長(zhǎng),。陽性或陰性對(duì)照若有不符合上述要求的結(jié)果，試驗(yàn)作廢,，重新進(jìn)行,。

　　評(píng)價(jià)規(guī)定

　　在5 次滅菌試驗(yàn)中，每次試驗(yàn)中的定量陽性對(duì)照組,，檢測(cè)回收菌量均達(dá)5 × 10cfu/ 片～5 × 10cfu/ 片,；定性陽性對(duì)照組，細(xì)菌生長(zhǎng)良好,。陰性對(duì)照應(yīng)無菌生長(zhǎng),。所有試驗(yàn)菌片全部無細(xì)菌生長(zhǎng)時(shí)，可判為滅菌合格,。