回收20立方優(yōu)尼克環(huán)氧乙烷滅菌柜

操作程序

(1) 根據(jù)試驗要求,，制備枯草桿菌黑色變種芽孢懸液和菌片,。菌片放入雙層聚乙烯塑料袋內(nèi)密封包裝,，每袋2片,。每次試驗用20袋,。

(2) 將滅菌器上,、中,、下3層,，每層內(nèi)、中、外各設一點,，共設9點,。每點物品中間布放1袋，共需18袋試驗菌片,。另將一袋（2片）菌片放置在室溫條件下作為陽性對照,。

(3) 按使用說明書所規(guī)定的環(huán)氧乙烷濃度、作用時間,、柜內(nèi)的溫度和相對濕度,，在滿載條件下進行環(huán)氧乙烷滅菌處理。滿載用物品,，隨滅菌器用途而定,。處理完畢，取出菌片,，分別移種于5 ml 營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基中,，置37℃ 培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，7d后觀察最終結果(定性培養(yǎng)檢測),。

對難以判斷結果的營養(yǎng)肉湯管,，取其中0.2ml懸液接種營養(yǎng)瓊脂平板，用無菌L棒涂抹均勻,，置37℃ 培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),。48h后涂片染色，顯微鏡下觀察菌落形態(tài),，或進一步做其他試驗,，判斷有無生長或生長的是否為試驗菌。若為非試驗菌,，則應重新進行試驗,。

(4) 測試中，應同時設立定性和定量陽性對照組與陰性對照組,。

(5) 定量陽性對照組,，以同批試驗用菌片置室溫下，待消毒或滅菌試驗組達規(guī)定作用時間后,，立即將該菌片2片分別放入含5.0mlPBS試管中,，各振敲打80次。取洗液按2.1.1.3 所示方法進行活菌培養(yǎng)計數(shù),。

(6) 定性陽性對照組,，以同批試驗用菌片置室溫下，待滅菌試驗組達規(guī)定作用時間后,，立即將該菌片2 片,，分別接種于5.0ml 營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基,，放入溫箱中作定性培養(yǎng)，觀察有細菌生長情況,。

(7) 陰性對照組,，以同批次試驗用未染菌樣片2 片，分別接種于5.0ml 營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基,，同時將未接種過的營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基放入培養(yǎng)箱中作定性培養(yǎng),，觀察有無細菌生長。

(8) 試驗重復5 次,。

(9)在5次試驗中,，每次試驗中的陽性對照菌片，回收菌量均應在5×10cfu/片～5×10cfu/片,；定性陽性對照組,，細菌生長良好；陰性對照應無菌生長,。陽性或陰性對照若有不符合上述要求的結果,，試驗作廢，重新進行,。

評價規(guī)定

在5 次滅菌試驗中,，每次試驗中的定量陽性對照組，檢測回收菌量均達5 × 10cfu/ 片～5 × 10cfu/ 片,；定性陽性對照組,，細菌生長良好。陰性對照應無菌生長,。所有試驗菌片全部無細菌生長時,，可判為滅菌合格。

回收20立方優(yōu)尼克環(huán)氧乙烷滅菌柜