全新未拆封6立方環(huán)氧乙烷滅菌柜

操作程序

(1) 根據(jù)試驗(yàn)要求,，制備枯草桿菌黑色變種芽孢懸液和菌片。菌片放入雙層聚乙烯塑料袋內(nèi)密封包裝,，每袋2片,。每次試驗(yàn)用20袋。

(2) 將滅菌器上,、中,、下3層，每層內(nèi),、中,、外各設(shè)一點(diǎn)，共設(shè)9點(diǎn),。每點(diǎn)物品中間布放1袋,，共需18袋試驗(yàn)菌片。另將一袋（2片）菌片放置在室溫條件下作為陽性對照,。

(3) 按使用說明書所規(guī)定的環(huán)氧乙烷濃度,、作用時(shí)間、柜內(nèi)的溫度和相對濕度,，在滿載條件下進(jìn)行環(huán)氧乙烷滅菌處理,。滿載用物品，隨滅菌器用途而定,。處理完畢,，取出菌片，分別移種于5 ml 營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基中,，置37℃ 培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),，7d后觀察結(jié)果(定性培養(yǎng)檢測)。

對難以判斷結(jié)果的營養(yǎng)肉湯管,，取其中0.2ml懸液接種營養(yǎng)瓊脂平板,，用無菌L棒涂抹均勻，置37℃ 培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),。48h后涂片染色,，顯微鏡下觀察菌落形態(tài)，或進(jìn)一步做其他試驗(yàn),，判斷有無生長或生長的是否為試驗(yàn)菌,。若為非試驗(yàn)菌，則應(yīng)重新進(jìn)行試驗(yàn),。

(4) 測試中,，應(yīng)同時(shí)設(shè)立定性和定量陽性對照組與陰性對照組。

(5) 定量陽性對照組,，以同批試驗(yàn)用菌片置室溫下,，待消毒或滅菌試驗(yàn)組達(dá)規(guī)定作用時(shí)間后，立即將該菌片2片分別放入含5.0mlPBS試管中,，各振敲打80次,。取洗液按2.1.1.3 所示方法進(jìn)行活菌培養(yǎng)計(jì)數(shù)。

(6) 定性陽性對照組,，以同批試驗(yàn)用菌片置室溫下,，待滅菌試驗(yàn)組達(dá)規(guī)定作用時(shí)間后，立即將該菌片2 片,，分別接種于5.0ml 營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基,，放入溫箱中作定性培養(yǎng)，觀察有細(xì)菌生長情況,。

(7) 陰性對照組,，以同批次試驗(yàn)用未染菌樣片2 片，分別接種于5.0ml 營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基,，同時(shí)將未接種過的營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基放入培養(yǎng)箱中作定性培養(yǎng),，觀察有無細(xì)菌生長,。

(8) 試驗(yàn)重復(fù)5 次。

(9)在5次試驗(yàn)中,，每次試驗(yàn)中的陽性對照菌片,，回收菌量均應(yīng)在5×10cfu/片～5×10cfu/片；定性陽性對照組,，細(xì)菌生長良好,；陰性對照應(yīng)無菌生長。陽性或陰性對照若有不符合上述要求的結(jié)果,，試驗(yàn)作廢,，重新進(jìn)行。

全新未拆封6立方環(huán)氧乙烷滅菌柜