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更新時間:2024-08-20 14:53:08瀏覽次數(shù):462次
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操作程序
(1) 根據(jù)試驗(yàn)要求,,制備枯草桿菌黑色變種芽孢懸液和菌片,。菌片放入雙層聚乙烯塑料袋內(nèi)密封包裝,每袋2片,。每次試驗(yàn)用20袋,。
(2) 將滅菌器上、中,、下3層,,每層內(nèi)、中,、外各設(shè)一點(diǎn),,共設(shè)9點(diǎn),。每點(diǎn)物品中間布放1袋,共需18袋試驗(yàn)菌片,。另將一袋(2片)菌片放置在室溫條件下作為陽性對照,。
(3) 按使用說明書所規(guī)定的環(huán)氧乙烷濃度、作用時間,、柜內(nèi)的溫度和相對濕度,,在滿載條件下進(jìn)行環(huán)氧乙烷滅菌處理。滿載用物品,,隨滅菌器用途而定,。處理完畢,取出菌片,,分別移種于5 ml 營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基中,,置37℃ 培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),7d后觀察最終結(jié)果(定性培養(yǎng)檢測),。
對難以判斷結(jié)果的營養(yǎng)肉湯管,,取其中0.2ml懸液接種營養(yǎng)瓊脂平板,用無菌L棒涂抹均勻,,置37℃ 培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),。48h后涂片染色,顯微鏡下觀察菌落形態(tài),,或進(jìn)一步做其他試驗(yàn),,判斷有無生長或生長的是否為試驗(yàn)菌。若為非試驗(yàn)菌,,則應(yīng)重新進(jìn)行試驗(yàn),。
(4) 測試中,應(yīng)同時設(shè)立定性和定量陽性對照組與陰性對照組,。
(5) 定量陽性對照組,,以同批試驗(yàn)用菌片置室溫下,待消毒或滅菌試驗(yàn)組達(dá)規(guī)定作用時間后,,立即將該菌片2片分別放入含5.0mlPBS試管中,,各振敲打80次。取洗液按2.1.1.3 所示方法進(jìn)行活菌培養(yǎng)計數(shù),。
(6) 定性陽性對照組,,以同批試驗(yàn)用菌片置室溫下,待滅菌試驗(yàn)組達(dá)規(guī)定作用時間后,,立即將該菌片2 片,,分別接種于5.0ml 營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基,放入溫箱中作定性培養(yǎng),,觀察有細(xì)菌生長情況,。
(7) 陰性對照組,,以同批次試驗(yàn)用未染菌樣片2 片,分別接種于5.0ml 營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基,,同時將未接種過的營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基放入培養(yǎng)箱中作定性培養(yǎng),,觀察有無細(xì)菌生長。
(8) 試驗(yàn)重復(fù)5 次,。
(9)在5次試驗(yàn)中,,每次試驗(yàn)中的陽性對照菌片,回收菌量均應(yīng)在5×10cfu/片~5×10cfu/片,;定性陽性對照組,,細(xì)菌生長良好;陰性對照應(yīng)無菌生長,。陽性或陰性對照若有不符合上述要求的結(jié)果,,試驗(yàn)作廢,重新進(jìn)行,。
評價規(guī)定
在5 次滅菌試驗(yàn)中,,每次試驗(yàn)中的定量陽性對照組,檢測回收菌量均達(dá)5 × 10cfu/ 片~5 × 10cfu/ 片,;定性陽性對照組,,細(xì)菌生長良好。陰性對照應(yīng)無菌生長,。所有試驗(yàn)菌片全部無細(xì)菌生長時,,可判為滅菌合格。
注意事項
(1) 溫度和相對濕度對環(huán)氧乙烷氣體殺菌效果影響較大,,故應(yīng)嚴(yán)格控制試驗(yàn)中的有關(guān)條件,。
(2) 環(huán)氧乙烷液體可溶解聚乙烯,、聚氯乙烯等,,不可將其液體滴落于此類物品上。環(huán)氧乙烷不論液體或氣體,,均可損壞賽璐璐制品,,試驗(yàn)時應(yīng)予注意。
(3) 環(huán)氧乙烷易燃易爆,,操作現(xiàn)場應(yīng)采取防火防爆措施,,不得有明火作業(yè)及電火花發(fā)生。
(4)吸入過多環(huán)氧乙烷氣體,,可引起頭痛,,嘔吐等中毒癥狀,嚴(yán)重者可致肺水腫等,。工作環(huán)境中應(yīng)有良好的通風(fēng),。在每日8h 工作中,,環(huán)氧乙烷濃度應(yīng)不超過1.82mg/m3 (1ppm),15min 工作中暴露濃度不超過9.1mg/m3(5.0ppm),。如出現(xiàn)中毒癥狀,,需迅速離開現(xiàn)場。輕者呼吸新鮮空氣,,直到癥狀消除,;重者應(yīng)及時送醫(yī)院。
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