器械*環(huán)氧乙烷滅菌柜

是一次性使用無(wú)菌器械生產(chǎn)企業(yè)的關(guān)鍵設(shè)備,，安裝操作、使用管理有其特殊要求,，使用環(huán)氧乙烷做滅菌劑,， 環(huán)氧乙烷是一種廣譜滅菌劑，可在常溫下殺滅各種微生物,，包括芽孢,、結(jié)核桿菌、細(xì)菌,、病毒,、真菌等。

 目前器械廣泛采用環(huán)氧乙烷來(lái)滅菌的 環(huán)氧乙烷是易燃易爆的有毒氣體,，分子式為C2H4O,，具有芳香的醚味，在4°C時(shí)候相對(duì)密度為0.884,，沸點(diǎn)為10.8°C,其密度為1.52g/cm3,。

優(yōu)點(diǎn)是：l 能殺滅所有微生物，包括細(xì)菌芽孢,。 2 滅菌物品可以被包裹,、整體封裝，可保持使用前呈無(wú)菌狀態(tài),。 3 相對(duì)而言,，EO不腐蝕塑料,、金屬和橡膠,不會(huì)使物品發(fā)生變黃變脆。 4 能穿透形態(tài)不規(guī)則物品并滅菌,。5 可用于那些不能用消毒劑浸泡,，干熱、壓力,、蒸汽及其他化學(xué)氣體滅菌之物品的滅菌,。

器械*環(huán)氧乙烷滅菌柜

目的

測(cè)定環(huán)氧乙烷滅菌器(下簡(jiǎn)稱(chēng)滅菌器) 對(duì)細(xì)菌芽孢的殺滅能力，以驗(yàn)證其滅菌性能是否符合原設(shè)計(jì)規(guī)定,。

試驗(yàn)器材

(1) 枯草桿菌黑色變種( ATCC 9372 )芽孢菌片,。

含菌量要求為5 ×10cfu/片～5 × 10cfu/片(按活菌培養(yǎng)計(jì)數(shù)結(jié)果計(jì))。在環(huán)氧乙烷量為600mg/L±30mg/L,，溫度為54℃±2℃,，相對(duì)濕度為60%±10% 條件下，菌片上芽孢存活時(shí)間應(yīng)≥7.8min,，殺滅時(shí)間≤58min,，D值為2.6min～5.8min。

(2) 染菌載體( 10mm × 10mm ,，以布片為代表,，必要時(shí)可隨滅菌對(duì)象，增用或改用其他載體,。

(3) 聚乙烯塑料袋( 封裝菌片用,，大小為60mm× 40mm ，厚0.2mm～0.4mm ),。

(4) 活菌培養(yǎng)計(jì)數(shù)所需器材(見(jiàn)2.1.1.3 ),。

(5) 使用說(shuō)明書(shū)中規(guī)定滅菌器可處理的物品(裝填滅菌器，使達(dá)滿(mǎn)載要求),。

操作程序

(1) 根據(jù)試驗(yàn)要求,，制備枯草桿菌黑色變種芽孢懸液和菌片。菌片放入雙層聚乙烯塑料袋內(nèi)密封包裝,，每袋2片,。每次試驗(yàn)用20袋。

(2) 將滅菌器上,、中,、下3層，每層內(nèi),、中,、外各設(shè)一點(diǎn)，共設(shè)9點(diǎn),。每點(diǎn)物品中間布放1袋,，共需18袋試驗(yàn)菌片,。另將一袋（2片）菌片放置在室溫條件下作為陽(yáng)性對(duì)照。

(3) 按使用說(shuō)明書(shū)所規(guī)定的環(huán)氧乙烷濃度,、作用時(shí)間,、柜內(nèi)的溫度和相對(duì)濕度，在滿(mǎn)載條件下進(jìn)行環(huán)氧乙烷滅菌處理,。滿(mǎn)載用物品,，隨滅菌器用途而定。處理完畢,，取出菌片,，分別移種于5 ml 營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基中，置37℃ 培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),，7d后觀(guān)察結(jié)果(定性培養(yǎng)檢測(cè)),。

對(duì)難以判斷結(jié)果的營(yíng)養(yǎng)肉湯管，取其中0.2ml懸液接種營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板,，用無(wú)菌L棒涂抹均勻,，置37℃ 培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)。48h后涂片染色,，顯微鏡下觀(guān)察菌落形態(tài),，或進(jìn)一步做其他試驗(yàn),，判斷有無(wú)生長(zhǎng)或生長(zhǎng)的是否為試驗(yàn)菌,。若為非試驗(yàn)菌，則應(yīng)重新進(jìn)行試驗(yàn),。

(4) 測(cè)試中,，應(yīng)同時(shí)設(shè)立定性和定量陽(yáng)性對(duì)照組與陰性對(duì)照組。

(5) 定量陽(yáng)性對(duì)照組,，以同批試驗(yàn)用菌片置室溫下,，待消毒或滅菌試驗(yàn)組達(dá)規(guī)定作用時(shí)間后，立即將該菌片2片分別放入含5.0mlPBS試管中,，各振敲打80次,。取洗液按2.1.1.3 所示方法進(jìn)行活菌培養(yǎng)計(jì)數(shù)。

(6) 定性陽(yáng)性對(duì)照組,，以同批試驗(yàn)用菌片置室溫下,，待滅菌試驗(yàn)組達(dá)規(guī)定作用時(shí)間后，立即將該菌片2 片,，分別接種于5.0ml 營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基,，放入溫箱中作定性培養(yǎng)，觀(guān)察有細(xì)菌生長(zhǎng)情況,。

(7) 陰性對(duì)照組,，以同批次試驗(yàn)用未染菌樣片2 片,，分別接種于5.0ml 營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基，同時(shí)將未接種過(guò)的營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基放入培養(yǎng)箱中作定性培養(yǎng),，觀(guān)察有無(wú)細(xì)菌生長(zhǎng),。

(8) 試驗(yàn)重復(fù)5 次。

(9)在5次試驗(yàn)中,，每次試驗(yàn)中的陽(yáng)性對(duì)照菌片,，回收菌量均應(yīng)在5×10cfu/片～5×10cfu/片；定性陽(yáng)性對(duì)照組,，細(xì)菌生長(zhǎng)良好,；陰性對(duì)照應(yīng)無(wú)菌生長(zhǎng)。陽(yáng)性或陰性對(duì)照若有不符合上述要求的結(jié)果,，試驗(yàn)作廢,，重新進(jìn)行。