實消：實罐滅菌是將培養(yǎng)基置于發(fā)酵罐中用蒸汽加熱,，到達預定滅菌溫度后，維持一定時間,，再冷卻到發(fā)酵溫度,，然后接種發(fā)酵，也稱實消或分批滅菌。操作關(guān)鍵點為三路進汽,，三路進汽即蒸汽從通風,、取樣和出料口進入罐內(nèi)直接加熱，直到所要求溫度,，并維持一定時間

一：影響滅菌的因素：

①pH值,。pH值對微生物耐熱性影響很大，pH為6.0～8.0時微生物最不易死亡,，pH ＜6.0時氫離子易滲透微生物細胞內(nèi),；

②培養(yǎng)基的顆粒物大小。當培養(yǎng)基中存在較大顆粒物質(zhì)特別是凝結(jié)成團的膠體時,，滅菌效果會受到影響,；

③培養(yǎng)基成分,。油脂,、糖類、蛋白質(zhì)都是傳熱不良介質(zhì),，會增加微生物耐熱性,，使滅菌困難。濃度較高培養(yǎng)基相對需要較高溫度和較長時間滅菌,。高濃度鹽類,，色素則減弱微生物耐熱性，故較易滅菌,。

二：具體滅菌步驟如下：

（1）打開夾套蒸汽閥,，利用蒸汽使罐體溫度上升至75℃～80℃，打開冷凝水排水閥,，排凈冷凝水,。打開取樣口，使少量蒸汽排出,。

（2）待罐內(nèi)溫度上升至80℃～90℃,，將空氣過濾器下的冷凝水閥門打開，然后開啟空氣管道蒸汽閥,，排凈冷凝水,，排水2～3分鐘左右，然后將冷凝水閥門關(guān)小,，確保有微量冷凝水緩緩流出,。

（3）升溫時，排氣閥門保持開啟,，且罐內(nèi)壓力不低于0.1Mpa,，查看各個管道蒸汽是否通暢，管道內(nèi)部要保持一定的壓力，避免出現(xiàn)滅菌死角,。

（4）溫度達到121℃時,，略微開啟接種口，使少量蒸汽排出即可,。應經(jīng)常調(diào)節(jié)排氣閥和進氣閥,，使罐內(nèi)壓力維持在0.1Mpa左右，持續(xù)20分鐘,。

（5）等待滅菌結(jié)束,，關(guān)閉接種口、補料口,、接種排氣閥,、夾套蒸汽閥、最后關(guān)閉進氣口下的蒸汽閥（快速關(guān)閉,，注意管道內(nèi)的壓力）,，再緩緩開啟進空氣閥，引進無菌空氣,，開啟空氣過濾器下方的冷凝水閥,，使空氣過濾器降溫，待空氣過濾器冷卻完畢,，再關(guān)閉此閥門,。期間保持罐內(nèi)壓力在0.02Mpa以上。

（6）待溫度降至100℃以下,，關(guān)閉排污閥,、開啟冷水閥或自來水閥、開啟回水閥,。使用控制面板,，設(shè)置自動調(diào)節(jié)溫度37℃。待溫度降至40℃時,，停罐,。

三：滅罐注意事項：

滅菌過程中要堅持下進（進蒸汽），上出（排氣）的原則,。調(diào)整閥門蒸汽大小,，按大閥門開小、小閥門開大的原則,，從各路進蒸汽管道進蒸汽給料液升溫,。升溫時排氣閥應開啟，保持流通,，避免罐內(nèi)出現(xiàn)假壓力,。夾套不能進冷卻水,，滅菌過程中要保持夾套排氣管路不能有冷卻水；滅菌恒溫過程中接種口和移種管路排氣,；恒溫過程中液面要翻騰,，防止假壓力。

發(fā)酵罐空消實消操作要點

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